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目的：(1)了解雌激素(estrogen，E)、姜黄素(curcumin，C)对海人酸(kainic acid，KA)杏仁核点燃大鼠癫痫发作的行为学和脑电图影响。(2)明确癫痫发作后大鼠海马神经元损害情况。(3)检测大鼠海马中c-Jun和谷氨酸脱羧酶67(glutamatedecarboxylase 67，GAD67)表达的变化，初探雌激素和姜黄素影响癫痫活动的部分生物学机制。
方法：(1)将成年Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠(体重250g～280g)行双侧卵巢切除术后饲养1周，术后第8天随机分为2组：假致痫组(NEP组，n=2只)和致痫组(n=40只)。依据KA致痫前不同的预处理，致痫组又分为对照组(又称茶油Oil组，简称O组，n=10只)，雌激素组(简称E组，11=10只)，雌激素加姜黄素组(简称EC组，n=10只)和姜黄素组(简称C组，11=10只)。E和EC组每日早9点腹腔注射2mg/kg的17β一雌二醇(溶于茶油中)，EC和C组每日早10点腹腔注射100 mg/kg的姜黄素(溶于茶油中)，而NEP和O组腹腔注射等量的茶油，共给药5天。第6天将各组大鼠麻醉后固定于脑立体定位仪下，根据大鼠脑立体定位图谱，在右侧杏仁基底核缓慢注入1ug的PBS(NEP组)或KA(致痫组)。参照Racine癫痫发作分级标准，观察大鼠致痫后6小时的行为学表现，比较各组致痫大鼠点燃率，潜伏期，到达点燃和重型发作的时间，及重型发作严重程度评分，并在每组随机抽取2只大鼠行双侧海马深部脑电图记录。(2)6小时观察期结束后，将各组大鼠灌流后断头取脑，做冰冻切片。用甲苯胺蓝尼氏小体染色观察大鼠海马神经元损害情况，用免疫组化方法检测海马中c-Jun和GAD67免疫阳性细胞表达的变化。
结果：(1)本实验致痫组点燃(连续3次3级及以上发作)成功率为90％，NEP组大鼠无痫性发作表现。点燃大鼠典型痫性活动表现为：注射KA后20～40分钟左右出现反复的须动、面部抽搐、点头、流涎、左上肢抽动等部分性发作，发作渐趋频繁，至给药后90～180分钟时发作达到高峰，出现双侧前肢阵挛并双后肢站立，甚至三肢或四肢抽搐、站立不稳、跌倒和姿势反射消失。第300分钟以后发作较前逐渐减轻。(2)行为学统计结果显示，在点燃成功大鼠中，除C组有2只发作仅达3级外，其余均达4/5级。各组大鼠痫性发作的潜伏期(明确的Racine 1级发作)、到达点燃和到达重型发作(Racine 4/5级)的时间无明显差异。对达到重型发作大鼠进行严重程度评分，发现E组评分最高，而EC组最低，较E组降低明显，有统计学差异，P<0.05。在观察期的第6个小时，E组大鼠仍然保持很高的惊厥性，Racine评分较其他组别明显增高，有统计学差异，P<0.01。而EC组在第5、第6小时Racine评分较E组下降明显，有统计学差异，P<0.05。(3)脑电图结果显示：致痫组大鼠均有痫样放电出现，证明海人酸致痫模型成功。(4)尼氏小体染色显示：大鼠杏仁核注射KA同侧(右侧)海马CA3区、齿状回门区神经元损害严重，其中，雌激素组神经元损害最严重，而且该组注射对侧(左侧)CA3区也出现了一定程度的损害。病理改变为：锥体细胞排列紊乱，形态不规则，胞膜破裂，尼氏小体外露，胞核碎裂、浓缩。各组双侧CA1区、齿状回区(dentate gyrus，DG)神经元均未见到损害。(5)免疫组化结果显示：c-Jun免疫阳性细胞主要在大鼠齿状回区颗粒细胞层，海马CA3及CA1区锥体细胞层表达。GAD67免疫阳性细胞在DG区颗粒细胞下层、分子层，海马CA3和CA1区始层表达，锥体细胞层偶有表达。右侧海马c-Jun和GAD67免疫阳性细胞数目表达明显少于左侧。在左侧海马，E组各区c-Jun免疫阳性细胞表达均明显多于其他组别，C组和O组c-Jun表达最少，EC组c-Jun表达介于E组和C组之间。在CA1区EC组较E组c-Jun免疫阳性细胞表达下降明显，有统计学意义，P<0.05。在左侧海马，O组和E组GAD67免疫阳性细胞表达最少，C组GAD67阳性细胞表达最多， EC组在CA1区GAD67阳性细胞表达较E组增多明显，有统计学差异，P<0.05。
结论：(1)高水平的雌激素可以促进癫痫的发作，体现在重型发作的持续时间、次数均明显增加；雌激素和姜黄素联合给药，可以降低大鼠痫性发作的严重程度。(2)高水平的雌激素预处理导致KA诱发的痫性发作海马神经元损害加重。(3)雌激素可能通过作用于c-Jun/AP-1通路抑制GAD67表达来加重海人酸诱导的癫痫发作；雌激素和姜黄素联合给药，大鼠海马CA1区c-Jun/AP-1活性受到抑制，而GAD67表达上调。