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家蝇(Musca domestica)是一种重要的昆虫资源，通常生活在杂菌横生的环境中，传播多种疾病，而自身却很少被细菌感染。本文整理了转录组注释名录中与家蝇免疫相关的凝集素基因，取其中的一条基因Mdlectin-C1，通过生物信息学分析、RT-qPCR、重组表达、Western blot、RNAi等技术对其进行了功能研究，主要研究结果如下： 1.整理发现本实验室所测的家蝇转录组中含有27个不同的凝集素家族成员，其中Mdlectin-C1～Mdlectin-C21为C-型凝集素家族成员，Mdlectin-S1和Mdlectin-S2为S-型凝集素家族成员，Mdlectin-L1和Mdlectin-L2是L-型凝集素成员，Mdlectin-FReD1和Mdlectin-FReD2是含有纤维蛋白原相关结构域的凝集素成员。 2.对家蝇转录组中的27条序列进行三级结构分析，虽然C-型凝集素的结构域CRD比较保守，但其二级结构元件组成却不完全一致，大部分组成有2个α螺旋，多个β折叠和无规卷曲，也有例外。S-型凝集素和L-型凝集素在结构组成上仅有β折叠，分子结构类似。含有纤维蛋白原相关结构域的FReD-凝集素也有两个α螺旋，但存在于近N端，且中间间隔1个短的β折叠。 3.家蝇的21条C-型凝集素与其他同源物种的比对结果显示，这些物种间以及物种内部的凝集素在氨基酸组成方面都存在很大差异，但这些凝集素大都具备一共同特征，即在C-型凝集素结构中心位置存在4个保守的半胱氨酸残基，这4个半胱氨酸残基会形成2个二硫桥用以维持CRD的空间结构。分子系统发育分析显示，家蝇的21条C-型lectins与其同源的51条序列分为五大类群，这与报道的依据除凝集素结构域之外的非凝集素结构域以及基因的结构，可将C-型凝集素分为不同亚族的说法一致。 4.对家蝇转录组中的1条序列Mdlectin-C1进行研究，通过RT-qPCR技术，对这一基因在不同组织、不同发育阶段、细菌刺激后进行了基因定量分析。运用原核表达系统进行体外重组表达，分离纯化得到了pET-DsbA-Mdlectin-C1融合蛋白，以这一蛋白为抗原制备了兔抗血清，进而进行了Western blot检测。结果显示，分析Mdlectin-C1基因在各组织的表达具有显著差异，主要在肠道中表达，脂肪体和血细胞次之。在研究Mdlectin-C1基因不同发育阶段的表达时，发现在家蝇从1龄幼虫到蛹的过程中， Mdlectin-C1的表达量逐步上升，直至蛹期达到最大值。家蝇幼虫经大肠杆菌刺激后，Mdlectin-C1在刺激后36 h显著上调；而经金黄色葡萄球菌刺激3 h后Mdlectin-C1表达量迅速上调，在6 h后显著下调，而于60 h进一步回升。以上结果分别在核酸及蛋白水平上说明了Mdlectin-C1参与家蝇抗菌免疫应答。 5.通过RNAi技术，投喂含dsRNA的细菌后，Mdlectin-C1低水平表达，同对照组相比存在极显著差异。对Mdlectin-C1基因敲低的幼虫进行细菌刺激，结果显示其致死率显著高于对照组，进一步说明Mdlectin-C1在家蝇幼虫抗菌免疫过程中具有重要作用。