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高原鼠兔(Ochotona Curzoniae)生活在海拔3,000 m以上的高寒草原，是一种青藏高原特有的非冬眠小型啮齿动物，高原鼠兔对低氧具有很强的耐受性，在长期进化过程中形成了一系列适应低氧环境的生理机制。LDH-C4又称精子特异性乳酸脱氢酶，先前的研究认为只在哺乳动物和鸟类的精子和睾丸中表达。我们前期的研究发现，Ldh-c基因在高原鼠兔体细胞中广泛表达。 本研究通过构建高原鼠兔Ldh-a、Ldh-b和Ldh-c基因的原核表达系统，分离纯化具有乳酸脱氢酶活性的LDH-A4、LDH-B4和LDH-C4，比较研究了它们的酶促动力学特征；应用LDH-C4特异性抑制剂和基因沉默的方法研究LDH-C4对高原鼠兔耐缺氧的作用及生理机制。研究表明，LDH-C4对丙酮酸的亲和力是对乳酸的90倍；LDH-C4对丙酮酸的亲和力分别是LDH-A4和LDH-B4的5倍和3倍；LDH-C4有利于催化丙酮酸向乳酸的转化。相比LDH-A4和LDH-B4，高原鼠兔LDH-C4的活力不易被高浓度的乳酸抑制。通过米氏方程得出， N-isopropyl oxamate是 LDH-C4特异性抑制剂，在0.1mmol/L的浓度时能抑制70％的LDH-C4活力，而仅抑制5％左右的LDH-A4和LDH-B4。实验组高原鼠兔骨骼肌注射N-isopropyl oxamate后，游泳时间显著性下降，心、肝脏、脑、骨骼肌等组织中的乳酸脱氢酶活力(Lactate dehydrogenase， LDH)、乳酸含量(Lactic acid，LD)和三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate，ATP)水平均显著下降，抗耐疲劳能力显著降低。实验组高原鼠兔骨骼肌注射siRNA-Ldh-c腺病毒并饲养5天后，Ldh-c基因在mRNA和蛋白水平上均下降；组织中LDH总活力，LD和ATP含量、动物耐疲劳能力显著下降。Ldh-c基因在高原鼠兔体细胞中表达，有利于催化丙酮酸向乳酸的转化，加速无氧糖酵解过程，为组织生命活动提供部分 ATP。高原鼠兔在此过程中减小了机体在低氧环境中对氧气的依赖，增强了对低氧环境的适应能力。