目的: 早期生长反应因子-1(early growth response-1，Egr-1)是一种重要的核转录因子，调控着多种与细胞增殖相关基因的表达，从而促进细胞的增殖和迁移。细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)在细胞周期的G1晚期开始增加，S期达高峰，对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)增殖进行着精细的调控，其表达水平与细胞增殖程度成正比，因此检测PCNA是评价细胞增殖状态的可靠指标。脱氧核酶(deoxyribozyme/DNA enzyme，DRz)是继核酶后发现的具有酶活性的脱氧核糖分子，它具有磷酸酯酶活性，可催化剪切特异的RNA。本实验采用Egr-1特异脱氧核酶(10-23 DNA Enzyme，ED5)对体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞进行转染，然后观察其对Egr-1及PCNA表达的影响，从而探讨ED5抑制血管平滑肌细胞增殖的作用机制。 方法: 取Wistar大鼠胸主动脉中膜，用组织块贴壁法进行VSMCs原代培养、鉴定并传代。本实验采用倒置相差显微镜法(形态学观察)和α-平滑肌肌动蛋白抗体(α-SM-actin)免疫细胞化学染色法共同进行VSMCs的鉴定，证明成功培养的为高纯度的血管平滑肌细胞，然后应用FuGENE6转染剂对VSMCs转染ED5及ED5乱序杂码寡核苷酸(ED5SCR)．并将实验分为三组：对照组、ED5组、ED5SCR组，然后根据转染时间不同另分亚组。采用免疫细胞化学法观察转染后Egr-1及PCNA表达的情况，并采用MetaMorph图像分析系统分析计算各组积分光密度值大小，最后采用SPSS12.0统计软件进行统计分析。 结果: 成功完成原代VSMCs培养并转染ED5及ED5SCR，然后根据转染时间不同，分别观察各组不同时间点的Egr-1及PCNA表达情况。实验发现：经10％胎牛血清刺激后，三组内Egr-11h即开始表达，且表达最强，随着时间的延长呈下降趋势；PCNA在三组内4h开始表达，24h到最高峰，之后呈略下降趋势。与对照组及ED5SCR组相比较，ED5组均在一定程度上抑制了Egr-1及PCNA的表达，实验数据通过SPSS12.0统计软件进行统计学分析，证明有统计学意义(P<0.05)。 结论: Egr-1是一种重要的核转录因子，可以促进VSMCs增殖；对体外成功培养的高纯度VSMCs进行ED5转染后，可以在一定程度上抑制Egr-1及PCNA表达。因此，ED5可以在一定程度上抑制体外培养的血管平滑肌细胞增殖，这种新的血管平滑肌细胞基因治疗方法可能会为支架再狭窄的治疗提供一种新的途径。