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研究目的：为子宫内膜癌(endometrial carcinoma, EC)诊断寻找新的甲基化标志物,并进一步探索其表观遗传调控机制。研究方法：(1)运用甲基化特异性PCR (methylation-specific PCR, MSP)法检测166例子宫内膜标本(包括正常内膜27例,单纯性增生25例,复杂性增生30例,不典型增生24例和子宫内膜样腺癌60例)中4个抑癌基因(tumor suppressor genes, TSGs)(SOCS1, SOCS3,3OST2, DLC1)启动子的甲基化状态。(2)单独或联合应用5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)和曲古抑菌素A (trichostatin A, TSA)处理子宫内膜样腺癌Ishikawa细胞株,实验分为4组(未处理组、5-Aza-CdR组、TSA组和5-Aza-CdR+TSA组)。运用MSP和实时荧光定量PCR (reverse transcription real-time quantitative PCR, qRT-PCR)法分别检测4组细胞中SOCS3和30ST2基因甲基化状态及mRNA表达水平的变化。(3)通过免疫组化(immunohistochemistry, IHC)、蛋白印迹(western blot, WB)和qTR-PCR技术检测4组细胞中UHRF1蛋白及mRNA表达水平的改变。(4)运用WB和染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)-qPCR技术检测4组细胞中UHRF1和不同甲基化状态的H3R8的表达变化及与甲基化的SOCS3和30ST2基因启动子的相互作用。结果：(1)在EC中,SOCS3和30ST2启动子存在着较高的甲基化率(分别为88.3%和78.3%),而SOCS1和DLCl基因的甲基化率较低(分别为13.3%和21.7%)。SOCS3不仅在EC中的甲基化率较高,在复杂性增生和不典型增生中也出现较高的甲基化率(分别为53.3%和54.2%),两组之间相比无显著统计学差异,但与其它各组相比均有显著统计学差异(p均<0.05)。3OST2仅在EC中存在高甲基化率,其余各组中的甲基化率均较低,且与子宫内膜癌患者的年龄和肿瘤分化程度相关(p<0.05)。(2)未处理组中SOCS3和30ST2启动子均呈完全甲基化状态。5-Aza-CdR或TSA单独处理后SOCS3和30ST2启动子甲基化被部分逆转,同时mRNA表达增加(P<0.01),且TSA的作用比5-Aza-CdR更为显著。联合应用组中SOCS3和30ST2甲基化被完全逆转,mRNA水平显著升高(P<0.01)。(3)未加药组Ishikawa细胞中UHRF1呈高表达状态,5-Aza-CdR处理后UHRF1的表达水平有所下调,而TSA处理后UHRF1表达显著下调。两药联用具有协同作用。(4)未加药组中发现,UHRF-1和H3R8me2s富集于甲基化的SOCS3和30ST2基因启动子区,而H3R8me2a富集较少。5-Aza-CdR和/或TSA处理后,UHRF1和H3R8me2s与启动子区脱离,与之同时,H3R8me2a富集明显增加。结论：SOCS3和30ST2基因启动子甲基化在子宫内膜样腺癌中具有重要作用,并可被UHRF1直接调控。同一组蛋白氨基酸的不同甲基化形式可发挥相反的生物学功能：H3R82s与基因抑制密切相关,而H3R82a却是基因活化的一个标志。