内源性ghrelin与急性胰腺炎炎症反应及代谢异常的关系研究

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第一部分内源性ghrelin在大鼠急性坏死性胰腺炎的动态变化以及GHRP-2干预的影响目的探讨内源性ghrelin在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)发病后的动态变化以及GHRP-2前干预对ANP的影响。方法90只SD大鼠分为C组、A组、G组。C组为假手术组,仅开腹后翻动胰腺。A组逆行胰胆管注射2%牛磺胆酸钠诱导大鼠ANP模型,G组在诱导模型前30分钟腹腔注射GHRP-2(200μg/kg),C组、A组腹腔注射生理盐水对照。分别在第3、6、12、24、48小时处死大鼠,称量腹水重量、取胰腺组织进行组织病理学检查进行病理学评分;分装血清分别应用底物酶法检测淀粉酶(AMS),ELISA法检测血清ghrelin、IL-β浓度;应用荧光定量PCR检测胰腺组织ghrelin mRNA表达。结果①A组、G组大鼠胰腺有明显坏死,光镜下见胰腺水肿、炎症细胞浸润、出血、坏死,病理评分均高于C组;A组与G组病理评分无差异;②A组、G组腹腔内有清亮腹水,腹水重量均高于C组,以第3小时统计学差异最明显(P<0.01);③A组、G组AMS高于C组(P<0.05或P<0.01),高峰出现在第6小时,A组与G组无差异;④A组、G组血清ghrelin含量均高于C组,G组第3小时的ghrelin高于A组(593.19±265.97pg/ml Vs310.82±148.64pg/ml, P<0.05),其余时间点无差异;⑤A组血清IL-1β在第3、6小时高于C组、G组(P<0.05);A组血清IL-1β随着时间延长而有所下降,高峰出现在第3小时;⑥血清ghrelin含量分别与血清IL-1β、胰腺炎症细胞浸润病理评分正相关;⑦A组各时点的胰腺组织ghrelin mRNA表达随着时间延长呈增高趋势,在第6、12、24小时高于C组。结论①实验性ANP大鼠血清ghrelin水平增高,与血清IL-1β、胰腺炎症细胞浸润程度呈正相关;②实验性ANP大鼠的胰腺组织ghrelin mRNA表达水平在发病早期增高;③GHRP-2前干预的早期可以降低ANP大鼠的血清IL-1β、提高血清ghrelin水平,对胰腺病理损伤无影响。第二部分血清ghrelin、obestatin与急性胰腺炎患者代谢异常的相关性研究目的观察血清ghrelin、obestatin在AP发病早期的动态变化并探讨两者与急性胰腺炎(AP)患者代谢异常的相关性。方法以83例AP患者作为观察组,24例其他疾病者为对照组。收集患者的入院前、入院后第1天、第3天、第5天的临床资料与入院后血清样本,比较重症急性胰腺炎(SAP)与轻症急性胰腺炎(MAP)生化检查项目的差异和两组间代谢异常的发生率。EIA法检测观察组与对照组的血清ghrelin、obestatin浓度,对比发生高血糖、高脂血症、低蛋白血症、低钙血症的AP患者血清ghrelin、obestatin与未发生代谢异常患者的差异,分析两者与代谢异常的相关性。结果①83例AP患者中有35例MAP,48例SAP,高血糖、高脂血症、低蛋白血症、低钙血症的总发生率分别为56.63%、48.19%、40.96%、27.71%;SAP组高脂血症、低蛋白血症、低钙血症的发生率分别为58.33%、54.17%、39.58%,显著高于MAP组的34.29%、22.86%、11.43%(P<0.05或P<0.01);SAP组的血清白蛋白、血钙水平分别为33.95±6.62g/L、1.98±0.24mmol/L,均低于MAP组的37.93±4.63g/L、2.16±0.21mmol/L (P<0.01);②SAP患者入院后第1天的血清ghrelin水平低于对照组(58.81±79.36pg/ml vs79.31±26.03pg/ml, P<0.05), MAP组与对照组无差异;MAP组入院第1天的血清obestatin水平(16.96±40.28pg/ml)高于对照组(16.96±40.28pg/ml vs8.87±2.21pg/ml, P<0.01),SAP组与对照组无差异;③AP患者血清ghrelin、 obestatin水平随着时间延长逐渐增高,第5天MAP组ghrelin水平高于SAP组(P<0.05),第1、3天MAP组obestatin水平高于SAP组(P<0.01);④低蛋白血症AP患者第5天ghrelin水平较低,与ALB水平正相关(r=0.317,P<0.01);高脂血症AP患者第1天obestatin水平较低,与甘油三酯水平呈负相关(r=-0.263,P<0.05);⑤血糖≥11.1mmol/L的患者入院第5天血清ghrelin水平和第1、3天obestatin水平均低于血糖<11.1mmol/L的患者。结论①AP患者的代谢异常发生率由高到低依次为高血糖、高脂血症、低蛋白血症、低钙血症,SAP组更易发生代谢异常,且代谢异常的程度较重;②AP患者血清ghrelin、obestatin水平随时间逐渐上升;③AP患者血清ghrelin、obestatin与AP发病后的代谢异常密切相关:ghrelin与白蛋白浓度正相关,obestatin与甘油三酯负相关,显著高血糖的AP患者血清ghrelin、 obestatin水平下降。
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