【摘 要】
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人类乳头瘤状病毒(humanpapillomavirus,HPV)的感染是引起宫颈癌的直接病因。人乳头瘤病毒58型(HPV58)属于高危型HPV,在我国有大规模的流行,并在我国妇女宫颈癌发病中占有特殊性的位
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人类乳头瘤状病毒(humanpapillomavirus,HPV)的感染是引起宫颈癌的直接病因。人乳头瘤病毒58型(HPV58)属于高危型HPV,在我国有大规模的流行,并在我国妇女宫颈癌发病中占有特殊性的位置。基于此,本论文通过构建pGEX-KGV-HPV58E7重组载体,将其转化到BL21大肠杆菌中得到BL21/pGEX-KGV/HPV58E7工程菌株,以乳糖诱导工程菌株表达蛋白;然后对其纯化获得GST-Erk-HPV58E7原核重组蛋白。GST-Erk-HPV58E7原核重组蛋白为HPV58E7抗体的获得提供抗原基础,也为我国特有高发的HPV-58重要转化基因E7及其表达产物重要癌抗原E7蛋白的生物学和免疫学功能研究奠定基础。
同时构建了pcDNA3.1/V5-His-Topo-HA-HPV58E7真核表达载体,转染人类肾上皮细胞系HEK-293细胞和宫颈癌细胞系C-33A细胞(该细胞系HPV检测为阴性),通过G418筛选后鉴定得到表达HPV58E7蛋白的pcDNA3.1/V5-His-Topo-HA-HPV58E7-HEK-293细胞系和pcDNA3.1/V5-His-Topo-HA-HPV58E7-C-33A细胞系,这两株人源细胞模型将为今后进一步研制HPV58型治疗性疫苗打下免疫学基础,为HPV-58重要癌抗原功能表位的研究和治疗性疫苗的研究与评价奠定坚实基础。
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