桑叶降血糖活性物质的联合提取、分离纯化及其协同作用研究

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我国是桑树的故乡也是世界上主要的桑叶产地之一,而且桑叶是国家卫生部认定的药食两用的资源,具有降血糖、降血压、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒和抑菌等诸多生物活性,其中降血糖活性备受关注。桑叶中降血糖活性物质主要是桑叶多糖、黄酮和生物碱,对它们进行深入研究具有十分重要的意义,能促进蚕桑资源的综合开发利用。本文以桑树品种“大10”为主要材料,对桑叶多糖、黄酮和生物碱的联合提取工艺、分离纯化方法及其降血糖活性的协同作用等进行了系统研究。结果如下:  (1)桑叶多糖、黄酮和生物碱的联合提取工艺优化研究:以桑树品种“大10”为主要材料,用热水浸提桑叶得到多糖和黄酮,用乙醇.盐酸溶液提取桑叶残渣得到生物碱,并采用响应面分析法优化提取工艺。优化的桑叶多糖和黄酮的提取工艺为:提取时间94 min,提取温度81℃,料液比1:20.4和提取次数2次,桑叶多糖和黄酮提取率分别为21.89%和2.713%,测定醇沉后的桑叶多糖提取率为6.732%;优化的桑叶残渣中生物碱的提取工艺为:提取时间142min,料液比1:27.1,乙醇浓度26%和提取次数2次,桑叶生物碱的提取率为0.3985%。  (2)桑叶多糖、黄酮和生物碱的分离纯化工艺研究:从AB-8、D101和X-5三种极性大孔树脂筛选出D101大孔树脂分离纯化桑叶多糖和黄酮,获得桑叶多糖和黄酮纯度分别为35.73%和38.64%。从001×7和001×14.5两种阳离子交换树脂中筛选出001×7阳离子交换树脂来分离纯化桑叶生物碱,获得桑叶生物碱纯度为29.75%。  (3)桑叶多糖、黄酮和生物碱的降血糖活性协同作用研究:研究在体外对α-葡萄糖苷酶活性抑制活性的协同作用和在体内对糖尿病小鼠降血糖活性的协同作用,得到三种活性物质的降血糖活性协同作用结果。  体外实验结果表明:在对α-葡萄糖苷酶抑制活性方面,桑叶黄酮和生物碱有良好的协同作用,桑叶黄酮-生物碱组的协同作用效果接近拜糖平组。  体内实验结果表明:在对糖尿病小鼠血糖值的影响方面,桑叶多糖和黄酮具有降血糖的协同作用;在提高糖尿病小鼠耐糖能力方面,桑叶黄酮和生物碱也具有协同作用,同时桑叶多糖、黄酮和生物碱三者之间亦表现出提高糖尿病小鼠耐糖能力的协同作用,比黄酮组和生物碱组的效果更好。
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