目的分离培养兔骨髓间充质干细胞;自体骨髓间充质干细胞复合骨膜移植修复兔关节软骨损伤。方法采集兔骨髓间充质干细胞,全骨髓培养法对其进行分离纯化,体外贴壁培养扩增;自体骨髓间充质干细胞复合骨膜移植修复兔关节软骨损伤,实验组缺损区植入未诱导的骨髓间充质干细胞用骨膜覆盖;对照组单纯用骨膜覆盖缺损区或不做任何处理。分别于术后6周和12周取材,做大体、光学显微镜等观察软骨损伤的修复情况。结果自体骨髓间充质干细胞移植术后6周,实验组软骨损伤区已由透明软骨样修复组织填充,术后12周软骨和软骨下骨得到良好修复,修复组织进一步改建,免疫组化证实修复组织内产生了Ⅱ型胶原;实验对照组损伤区有部分修复,基底和表面细胞成分较多;空白对照组由纤维组织修复,但基底也可见少量软骨样细胞。实验组组织学评分优于两对照组。结论全骨髓培养法是一种分离骨髓间充质干细胞有效方法,体外培养扩增的兔骨髓间充质干细胞生长稳定,增殖能力强,可作为组织工程的种子细胞;以骨髓间充质干细胞复合骨膜移植可促进关节软骨损伤的修复,在尚无更为完善的治疗方法出现之前,利用此法修复关节软骨损伤时不失为一种有效方法。