研究背景：　　胃肠粘膜损伤后上皮有自身修复的能力，早期阶段是快速修复，主要通过细胞迁移来完成，即损伤的上皮细胞坏死脱落，邻近或底部的上皮细胞快速迁移并覆盖损伤部位，以重建粘膜的完整性；后一阶段包括细胞增殖、分化、迁移等，一般需要几个细胞周期。胃肠道粘膜快速修复中多胺起关键作用，多胺的调控是众多信号传递路径的焦点。　　多胺是一类低分子非蛋白质含氮化合物，主要有腐胺（putrescine，Put）、精脒（spermidine，Spd）和精胺（spermine，Spm）。由于多胺本身不具备紫外-可见光谱发色团和产生荧光的分子结构，因此多采用化学衍生-高效液相色谱法测定生物样品中多胺含量。国内尚未见报道测定小肠上皮细胞（IEC-6）中多胺含量的方法及苯甲酰氯衍生化条件的考察。　　益气健脾中药具有保护胃肠黏膜的作用，可通过鸟氨酸脱羧酶和多胺机制，促进胃肠黏膜损伤后的修复过程中上皮细胞的迁移、增殖和分化等。　　研究目的　　建立柱前衍生-高效液相色谱法测定小肠上皮细胞（IEC-6）中多胺含量的方法，考察和优化苯甲酰氯衍生化条件；观察益气健脾中药白术、黄芪、党参和甘草糖复合物对IEC-6细胞划痕损伤后细胞迁移过程中多胺水平的影响，为研究益气健脾中药胃肠粘膜损伤修复作用机理提供参考。　　研究方法：　　1、以苯甲酰氯为衍生剂，紫外检测器检测，柱前衍生-高效液相色谱法测定小肠上皮细胞IEC-6中多胺含量，对衍生化温度、衍生化时间及色谱条件进行考察与优化，并对所建立检测方法的准确性、重复性、稳定性等进行评价。　　2、IEC-6细胞划痕损伤后，加入益气健脾中药白术、黄芪、党参和甘草糖复合物，分别培养6h、12h和24h，收集细胞并测定多胺（均指腐胺、精脒和精胺）含量，观察其对细胞划痕损伤后细胞迁移过程中多胺水平的影响。　　研究结果：　　1、建立了柱前衍生-高效液相色谱法测定小肠上皮细胞（IEC-6）中多胺含量的方法：衍生温度为50℃，衍生时间为8h时，各指标成分的峰面积均较大；在柱温为25℃、流动相为甲醇:水（55:45）、流速1.0mL/min、检测波长234nm的条件下，各指标成分峰分离良好。线性范围：腐胺0.054～1.35nmol，精脒0.046～1.15nmol，精胺0.080～2.00nmol，r≥0.9995；高、中、低浓度的日内精密度：腐胺RSD1.5%～3.2%，精脒RSD1.2%～4.5%，精胺RSD1.3%～4.1%；日间精密度：腐胺RSD1.2%～2.7%，精脒RSD1.0%～3.5%，精胺RSD0.8%～3.9%；高、中、低浓度的回收率：腐胺85%～110%，精脒88%～110%，精胺90%～108%，多胺含量测定方法具有较好的准确性，且较灵敏、简便，适用于IEC-6细胞中多胺含量的测定。　　2、白术、黄芪、党参和甘草糖复合物给药剂量为50mg/L和100mg/L（糖复合物中多糖的含量分别为52.40%、45.82%、40.35%、45.24%）时，对小肠上皮细胞（IEC-6）划痕损伤后细胞迁移过程中多胺水平有不同程度的影响。白术糖复合物（100mg/L）给药后12h和24h可以显著提高细胞内多胺含量；黄芪糖复合物（100mg/L）给药后6h、12h和24h均提高细胞内多胺含量；党参糖复合物（100mg/L）给药后12h对多胺含量增高有一定的促进作用；甘草糖复合物（100mg/L）给药后12h和24h时可显著提高细胞内多胺含量。综合比较，白术、黄芪、党参、甘草各药糖复合物给药剂量为100mg/L，给药后培养12h时，较显著提高划痕损伤后细胞迁移过程中细胞多胺含量，白术、黄芪、甘草糖复合物（100mg/L）对小肠上皮细胞损伤后修复过程中多胺水平促进作用较明显。　　研究结论：　　建立的小肠上皮IEC-6细胞内多胺含量测定方法具有较好的准确性，且较灵敏、简便，可作为小肠上皮细胞中多胺的分析检测方法，用于研究多胺对小肠上皮细胞增殖、迁移、分化、凋亡等方面的影响，以及研究药物通过对多胺影响而发挥药理作用等方面。并观察到白术、黄芪、党参和甘草糖复合物能提高划痕损伤后细胞迁移过程细胞内多胺含量，表明益气健脾中药肠粘膜损伤修复作用与提高肠上皮细胞内多胺水平有关。