论文部分内容阅读
最近在理解癌症和代谢之间关系方面的研究，突出了由三个连续的酶促反应组成的丝氨酸合成途径（SSP）的重要性。人源3-磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）催化SSP合成葡萄糖衍生丝氨酸的第一步，并且在多种癌细胞中显示高表达，包括乳腺癌，黑色素瘤，结肠癌，胶质瘤，鼻咽癌等。
本研究应用基于酶活性的高通量筛选技术，从不同来源的天然产物中筛选得到靶向PHGDH的先导化合物，并进一步在细胞及动物水平测定其活性，建立了靶向PHGDH的天然产物（NP）抑制剂的筛选和活性评价体系。
Azacoccone E，一种来自黄曲霉培养物的次生代谢产物，在体外对PHGDH表现出有效的酶抑制活性。利用微量热泳动（MST）测定和细胞热转变分析（CETSA）证实，Azacoccone E直接与PHGDH结合。并且在细胞水平证明，该化合物对PHGDH依赖性癌细胞具有选择性毒性，并能引起细胞凋亡。进一步的酶活性动力学实验，显示Azacoccone E是底物3-磷酸甘油酸（3-PG）的非竞争性抑制剂，并表现出时间依赖性抑制效果。此外，分子对接证明了Azacoccone E在PHGDH的变构位点中具有低结合能。因此，Azacoccone E其可作为PHGDH的潜在抑制剂来开发。
受到药食同源的启发，来自膳食tomatillo中的Ixocarpalactone A（IoxA），体外酶活性测定为一类有效的PHGDH非竞争性抑制剂，分子对接结果预测IoxA结合在酶的变构位点，利用MST检测、药物亲和力响应靶点稳定性（DARTS）实验和siRNA敲低PHGDH表达实验证明IoxA通过靶向PHGDH抑制胰腺癌生长，进一步的体内实验证明，化合物在50mg/kg和100mg/kg表现出有效的抑制小鼠肿瘤细胞生长作用。IoxA为一类有效的PHGDH天然小分子抑制剂，具有巨大的开发和研究价值，被认为是靶向PHGDH治疗癌症的可能候选药物。
本研究应用基于酶活性的高通量筛选技术，从不同来源的天然产物中筛选得到靶向PHGDH的先导化合物，并进一步在细胞及动物水平测定其活性，建立了靶向PHGDH的天然产物（NP）抑制剂的筛选和活性评价体系。
Azacoccone E，一种来自黄曲霉培养物的次生代谢产物，在体外对PHGDH表现出有效的酶抑制活性。利用微量热泳动（MST）测定和细胞热转变分析（CETSA）证实，Azacoccone E直接与PHGDH结合。并且在细胞水平证明，该化合物对PHGDH依赖性癌细胞具有选择性毒性，并能引起细胞凋亡。进一步的酶活性动力学实验，显示Azacoccone E是底物3-磷酸甘油酸（3-PG）的非竞争性抑制剂，并表现出时间依赖性抑制效果。此外，分子对接证明了Azacoccone E在PHGDH的变构位点中具有低结合能。因此，Azacoccone E其可作为PHGDH的潜在抑制剂来开发。
受到药食同源的启发，来自膳食tomatillo中的Ixocarpalactone A（IoxA），体外酶活性测定为一类有效的PHGDH非竞争性抑制剂，分子对接结果预测IoxA结合在酶的变构位点，利用MST检测、药物亲和力响应靶点稳定性（DARTS）实验和siRNA敲低PHGDH表达实验证明IoxA通过靶向PHGDH抑制胰腺癌生长，进一步的体内实验证明，化合物在50mg/kg和100mg/kg表现出有效的抑制小鼠肿瘤细胞生长作用。IoxA为一类有效的PHGDH天然小分子抑制剂，具有巨大的开发和研究价值，被认为是靶向PHGDH治疗癌症的可能候选药物。