研究目的:本研究旨在检测BCR-ABL(-)骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者的IL-9和IL-6的表达水平及外周血Th9细胞比例,并探究IL-9表达与JAK2基因突变负荷的相关性,探讨其在MPN疾病的作用。研究方法:本研究纳入2018年至2019年间于天津医科大学总医院血液科就诊的71例MPN初治患者(真性红细胞增多症(PV)32例,原发性血小板增多症(ET)22例和原发性骨髓纤维化(PMF)17例),治疗后复查患者58例作为治疗组,健康对照组20例。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定各组骨髓上清液IL-6和IL-9水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测骨髓单个核细胞中的IL-6和IL-9 m RNA的相对表达水平,应用多参数流式细胞术(FCM)检测各组外周血中的Th9细胞比例,将骨髓单个核细胞中IL-6 m RNA表达水平和IL-9 m RNA表达水平与血常规指标进行相关性分析,并进一步追踪分析JAK2基因突变负荷与IL-9水平之间的相关关系。研究结果:1.初诊组、治疗组和对照组中骨髓上清IL-6水平及骨髓单个核细胞IL-6m RNA相对表达水平分别为:[(164.5±23.75)ng/L]、(7.162±12.46),[(146.7±9.417)ng/L]、(1.338±0.7369),[(129.2±8.15)ng/L]、(0.2989±0.3240);各组骨髓上清IL-9水平及骨髓单个核细胞IL-9 m RNA相对表达水平分别为:[(202.7±71.63)ng/L]、(0.05621±0.1014),[(510.1±143.1)ng/L]、(0.3192±0.2862)和[(399.2±87.34)ng/L]、(0.1175±0.1814),且各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);2.MPN初诊组外周血Th9细胞比例[(1.730±1.005)%]显著低于治疗组[(11.47±7.365)%]和对照组[(4.574±1.368)%](P<0.0001);3.JAK2~+组骨髓上清中IL-6水平[(172.1±25.07)ng/L]高于JAK2~-组[(156.8±19.78)ng/L])(P<0.05),JAK2~+组骨髓单个核细胞IL-6m RNA表达水平(10.42±16.27)高于JAK2~-组(3.640±4.449)(P<0.05);JAK2~+组骨髓上清IL-9水平[(178.0±64.58)ng/L]显著低于JAK2~-组[(228.1±70.44)ng/L])(P<0.05),JAK2~+组骨髓单个核细胞IL-9m RNA表达水平(0.02004±0.03560)显著低于JAK2~-组(0.09341±0.1306)(P<0.01);且IL-9 m RNA表达水平与JAK2基因突变负荷呈负相关(R=-0.55,P<0.0001);4.IL-6和IL-9m RNA表达水平与血常规指标相关性分析:IL-6与MPN患者外周血中的淋巴细胞计数呈负相关(r=-0.49,P<0.01),IL-9和MPN患者外周血中淋巴细胞计数呈正相关(r=0.53,P<0.0001);IL-6与初诊PV的Hb及初诊ET的PLT均呈正相关(r=0.87,P<0.0001)(r=0.64,P<0.05),IL-9和初诊PV的Hb及初诊ET的PLT均呈负相关(r=-0.54,P<0.01)(r=-0.46,P<0.05);5.追踪一名新诊断的JAK2(+)PV患者经干扰素治疗一年内JAK2基因负荷及IL-9m RNA表达水平变化发现:在初次使用干扰素-a治疗3月时复查IL-9表达较前明显升高,随后随着治疗的持续进行JAK2/V617F突变基因负荷逐步减低,IL-9表达水平逐渐降低至接近正常水平。结论:1、初诊组MPN患者骨髓中IL-6表达水平显著高于治疗组及对照组,经治疗后IL-6水平下降,提示IL-6在MPN患者中表达增加,功能亢进;2、初诊组MPN患者骨髓中IL-9表达水平及外周血中Th9细胞比例显著低于治疗组和对照组,经治疗后IL-9水平及Th9细胞比例均明显高于初诊组,提示IL-9在MPN患者中表达减低;3、在初诊组中,IL-6的表达水平为PMF>PV>ET,IL-9的表达水平为PMF