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目的:研究MRTF-A对Aβ25-35诱导皮层神经元损伤的保护作用及其机制。方法:1. MRTF-A对Aβ25-35诱导皮层神经元损伤及其对神经丝蛋白、MRTF-A、CaMKⅡ表达的影响：Aβ25-35脑室注射(AP:-3.8mm, ML:±3.0mm, DV:-3.2mm)诱导制备阿尔茨海默症大鼠模型，用Morris水迷宫对大鼠行为学进行检测。采用免疫组化和免疫荧光观察大鼠脑神经丝蛋白、MRTF-A、CaMKⅡ的表达。2. MRTF-A对Aβ25-35诱导原代皮层细胞突触形态及神经丝蛋白表达的影响：将原代皮层细胞分成control组、Aβ25-35处理组、MRTF-A转染组。用免疫荧光标记神经丝蛋白，在激光共聚焦观察皮层细胞突触形态及神经丝蛋白表达。3. MRTF-A对Arc（Activity-regulated cytoskeletal-associated protein）表达的影响：将原代皮层细胞分成Control组、Aβ25-35处理组、MRTF-A转染组。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA和蛋白水平检测Arc表达。4. MRTF-A对Arc启动子转录活性的影响：转染MRTF-A (0.2μg)至皮层细胞，分别共转报告基因Arc luciferase reporter或其突变体DN-Arc luciferase reporter质粒，用Luciferase reporter法检测Arc luciferase reporter或DN-Arc luciferase reporter转录活性的变化。5.MRTF-A上调Arc表达是否与CaMKⅡ有关：转染MRTF-A (0.2μg)至皮层细胞，并用CaMKⅡ选择性抑制剂KN-62处理皮层细胞，用Western blot法检测皮层细胞Arc蛋白表达。结果:1. MRTF-A对Aβ25-35诱导皮层神经元损伤及其对神经丝蛋白、MRTF-A、CaMKⅡ表达的影响：大鼠行为学结果表明，Aβ25-35脑室注射后大鼠无论是潜伏期还是游泳距离都显著性升高，说明大鼠学习记忆能力下降；大鼠脑组织切片显示：Aβ25-35脑室注射后大鼠脑神经元突触严重丢失，神经丝蛋白表达量下降；皮层、海马区MRTF-A和CaMKⅡ的表达均明显上升，具有一定的相关性。2. MRTF-A对体外培养的原代皮层神经元突触可塑性的影响：MRTF-A能明显上调神经丝蛋白表达，降低Aβ25-35对突触的损伤，保持突触结构的完整性；RT-PCR和Western blot法检测结果显示：MRTF-A可显著性逆转Aβ25-35对Arc表达的下调（p<0.05）；Luc结果显示，MRTF-A可显著性上调Arc luciferase reporter的转录活性(p<0.05)，但是对DN-Arc luciferase reporter的转录活性无上调作用。3. MRTF-A上调Arc表达是否与CaMKⅡ有关;Western blot检测结果显示, KN-62能显著抑制MRTF-A诱导Arc表达的作用，且存在剂量依赖性（p<0.05或p<0.01）。结论:1. Aβ25-35脑室注射诱导的AD大鼠，其学习记忆能力显著下降；而且大鼠脑组织中MRTF-A、CaMKⅡ的表达均明显上升，提示MRTF-A、CaMKⅡ可能参与了AD的病理过程。2. MRTF-A能明显上调神经丝蛋白表达，降低Aβ25-35对突触的损伤，保持突触结构的完整性。MRTF-A通过作用Arc启动子CArG box，激活其转录，逆转Aβ25-35对Arc表达的下调。3. MRTF-A上调Arc能被CaMKⅡ选择性抑制剂KN-62逆转，提示CaMKⅡ可能参与了MRTF-A调控Arc表达。