【摘 要】
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胸腺素β(Tβ)是一个具有43氨基酸的多肽,在体内、外有广泛的免疫活性.该文通过聚合酶链式反应(PCR),扩增Tβ cDNA,并在PCR引物中引入EcoRI和HindⅢ酶切位点,实现定向克隆.
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胸腺素β<,4>(Tβ<,4>)是一个具有43氨基酸的多肽,在体内、外有广泛的免疫活性.该文通过聚合酶链式反应(PCR),扩增Tβ<,4> cDNA,并在PCR引物中引入EcoRI和HindⅢ酶切位点,实现定向克隆.首先把扩增产物克隆于pGEM-T载体,经测序证实扩增产物顺序的正确性后,再将Tβ<,4>基因定向克隆于融合型表达载体pWW-100质粒及非融合型表达载体pKK223-3质粒中,转化大肠杆菌JM109.通过酶切分析和PCR扩增挑选重组子,重组子经IPTG诱导后,从PAGE电泳及ELISA结果可看出融合型及非融合型Tβ<,4>蛋白均获得了表达.该文还通过PCR方法,初步证实人染色体Tβ<,4>基因的蛋白编码区不含内含子.
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