论文部分内容阅读
近年来,多中心研究表明中国人普遍存在维生素D(vitamin D,VitD)缺乏或不足,尤其是婴幼儿。VitD作为一种脂溶性维生素,其基本功能是调节钙磷代谢。随着对VitD研究的深入,尤其是通过高通量基因测序技术发现多种免疫细胞不仅具有可以编码维生素D的受体(vitamin D receptor,Vit DR)基因,且通过蛋白质技术发现VitDR可以表达于免疫细胞,参与并调节免疫细胞的功能,与多种免疫疾病的发生与发展密切相关。过敏性紫癜又称亨-舒综合征(Henoch-Schonleinpurpura,HSP),隶属于免疫系统疾病。HSP是一种全身性小血管炎性疾病,以免疫复合物(Immune complexes,IC)在受累组织小血管沉积为主要病理特征,是儿童时期最为常见的免疫性血管炎性疾病,好发于学龄前及学龄儿童,发病率及复发率较高。在发病患儿中,以发生紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephriti,HSPN)最为严重,肾脏损害程度是影响预后的最主要因素,发生终末期肾病的预后极差,是严重影响患儿身心健康的疾病之一。该病病因多样,发病机制复杂,但是作为一种自身免疫性疾病往往HSP患儿伴随有血清Vit D缺乏或不足。为进一步确认HSP及其不同亚型中与血清Vit D水平变化的关系,Vit D与各种免疫指标之间的相关性,探讨VitD是否可以通过调节免疫细胞的功能而在HSP发病中发挥作用。本研究利用化学发光的方法检测HSP患儿血清Vit D的水平,利用流式细胞术检测淋巴细胞各亚群的变化,利用免疫比浊法检测血清中各类免疫球蛋白的含量变化,探讨HSP与VitD和免疫功能变化之间的相关性,以期为临床诊断与治疗提供新思路和策略。研究目的1.通过比较HSP患儿体内血清VitD水平与健康儿童之间的差异,以及不同亚型HSP患儿之间血清Vit D水平的差异,探讨血清Vit D的水平变化与HSP疾病及其不同亚型的相关性。2.通过对比分析HSP患儿体内血清Vit D水平与各项免疫指标相关性,探讨Vit D是否可以通过调节免疫细胞的功能参与HSP的发病过程,并作为HSP疾病进展的预测指标。研究方法选取2018年7月至2019年6月在郑州大学第三附属医院收治的诊断为HSP的患儿69例作为HSP组,诊断标准符合欧洲抗风湿病联盟和欧洲儿科风湿病学会(EULAR/PReS)对HSP的统一诊断标准;再将HSP组依据中华医学会儿科学分会肾脏病学组制定的紫癜性肾炎诊断标准分为紫癜性肾炎组(HSPN组)和非紫癜性肾炎组(NHSPN组);选取同期门诊健康体检儿童70例为对照组。HSP患儿于入院后24h内清晨采集静脉全血,对照组儿童于体检时抽取静脉全血,分别用于血清25(OH)D检测、淋巴细胞亚群检测和血清免疫球蛋白的检测。采用SPSS23.0软件进行数据处理和分析,定量资料采用均数±标准差(x±s)表示,定性资料采用百分数(%)表示;两组间定量资料比较采用t检验或秩和检验,多组数据采用单因素方差分析,定性资料组间比较采用χ2检验;对于相关性分析,采用Spearman秩分析,取a=0.05为显著性水平,P<0.05为差异具有统计学意义。本研究涉及的用于研究用途的儿童血液标本,经我院伦理委员会批准。结果1.不同组儿童血清25(OH)D水平比较与正常对照组比较,HSP组血清25(OH)D水平明显降低[(20.34±7.43)vs(36.48±1.40)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05)。与NHSPN组比较,HSPN组血清25(OH)D水平明显降低[(14.35±5.16)vs(21.98±1.06)ng/mL],差异具有统计学意义(P<0.05)。2.不同HSP亚组儿童血清25(OH)D水平比较与单纯皮肤型组比较,关节型组、腹型组、混合型组血清25(OH)D水平均明显降低[(17.21±5.30)vs(23.60±1.85)ng/mL;(20.46±2.90)vs(23.60±1.85)ng/mL;(20.69±1.43)vs(23.60±1.85)ng/mL],差异具有统计学意义(均P<0.05)。与腹型组、混合型组比较,关节型组血清25(OH)D水平明显降低[(17.21±5.30)vs(20.46±2.90)ng/mL,(17.21±5.30)vs(20.69±1.43)ng/mL],差异具有统计学意义(均 P<0.05)。混合型组和腹型组之间比较,血清25(OH)D水平[(20.69±1.43)vs(20.46±2.90)ng/mL]的差异无统计学意义。3.不同组儿童淋巴细胞亚群检测结果比较与健康对照组比较,HSP组CD3+CD4+T淋巴细胞及CD3-CD16+CD56+NK细胞占总淋巴细胞相对百分数,明显降低[(26.1±7.0)vs(33.2±6.2);(11.9±5.9)vs(14.4±3.7)],差异具有统计学意义(P<0.05);CD19+B淋巴细胞占总淋巴细胞相对百分数,明显升高[(20.7±3.6)vs(18.9±4.4)],差异具有统计学意义(均P<0.05)。HSP组CD3+T淋巴细胞占总淋巴细胞相对百分数、CD3+CD8+T淋巴细胞占总淋巴细胞相对百分数、CD4/CD8比值与健康对照组相比分别为[(63.2±8.7)vs(65.1±2.4);(27.5±10.3)vs(28.8±4.2);(1.2±0.5)vs(1.3±0.6)]差异无统计学意义。4.HSP组血清25(OH)D水平与淋巴细胞亚群相关性分析HSP 组血清 25(OH)D 水平与 CD3+CD4+T 细胞、CD3-CD16+CD56+NK 细胞呈正相关,与CD19+B细胞呈负相关相关系数分别为0.496、0.312、-0.231均P<0.05。HSP组血清25(OH)D水平与CD3+CD8+T细胞相关系数为-0.026,P>0.05,无明显相关性。5.不同组儿童血清免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)水平比较与健康对照组比较,HSP组血清IgM水平明显升高[(1.6±0.48)vs(0.7±0.14)g/L];IgG水平明显降低[(10.64±2.34)vs(12.32±2.15)g/L]差异具均有统计学意义(均P<0.05)。血清IgA水平与健康对照组相比[(1.15±0.73)vs(1.12±0.56)g/L],差异没有统计学意义。6.HSP组血清25(OH)D水平与免疫球蛋白相关性分析HSP组血清25(OH)D水平与IgA呈负相关,相关系数为-0.354,P<0.05;与IgG、IgM相关系数分别为-0.137、-0.212,无明显相关性,均P>0.05。结论1、血清25(OH)D与免疫调节具有相关性,可能参与HSP的发病与进展;2、同时检测Vit D和淋巴细胞亚群的变化,可以对HSP的进展情况进行监测。