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[目的]小胶质细胞是中枢神经系统的固有免疫细胞,在中枢神经系统免疫反应中起着重要作用。Nur77在中枢神经系统内高表达,参与炎症反应及细胞增殖等生物进程。本实验的研究旨在探讨Nur77在LPS诱导的小胶质细胞激活中的作用。[方法]用LPS刺激WT及Nur77-/-原代小胶质细胞,收集细胞蛋白并进行质谱分析。用实时定量PCR(Q-PCR)及免疫蛋白印记(western blot)实验的方法验证差异性蛋白的表达。[结果]在WT及Nur77-/-小胶质细胞中,共有2004种差异性蛋白,其中在LPS刺激前后分别有749及677种蛋白差异性表达。Nur77-/-小胶质细胞在LPS刺激后差异性蛋白基因本体学分析。在细胞组分方面上调蛋白包括核糖体、核糖核蛋白复合物及胞质小核糖体亚基等,下调蛋白包括蛋白酶体、蛋白酶体调节微粒及蛋白酶体附件复合物等;在分子功能方面上调蛋白涉及氨基肽酶的调节活化、肝糖原的磷酸化激活及磷酸化酶的活化等,下调蛋白涉及参与核小体的DNA结合,突触融合蛋白的结合及SNAP受体活化等;在生物学功能方面上调蛋白可参与蛋白转运、跨膜蛋白转运及囊泡转运等功能,下调蛋白主要参与囊泡储存,囊泡溶解及跨膜转运等功能。对差异蛋白进行信号通路分析显示LPS后Nur77-/-小胶质细胞的差异性蛋白分布在小胶质细胞激活的重要信号通路中,其中包括Toll样受体信号通路、MAPK信号通路、FcyR调节的吞噬作用及小胶质细胞的催化作用。此外通过对差异蛋白的分析我们发现Nur77可能是vav1及ERK1/2信号通路中的上游物质。[结论]本篇研究主要是研究Nur77敲除小胶质细胞中蛋白表达水平的变化并且初步探索了LPS后Nur77对小胶质细胞的活化作用。LPS后Nur77可影响小胶质细胞激活的信号通路,其中包括Toll样受体信号通路、MAPK信号通路、FcγR调节的吞噬作用及趋化相关信号通路。同时,我们也首次发现Nur77可通过ERK1/2信号通路及Vav1的表达来调节LPS诱导的小胶质细胞的激活。为研究Nur77在LPS诱导的小胶质细胞激活的作用提供了新的研究视角。