人防御素-α(HD-α)克隆表达纯化及生物活性初步检测

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本课题利用Gene-Bank检索得到HD-α基因序列,体外化学合成DNA碱基序列并在5’端加入羟胺裂解位点。退火、补平、酶切后连接入pBV220-IL4载体,通过与IL4融合表达来提高α-防御素基因的表达。将连接子转化大肠杆菌DH5α感受态细菌,酶切鉴定、测序正确后,获得阳性克隆。解决了天然提取α-防御素产量较低、且成本高这一问题。构建了人α-防御素基因重组表达载体,获得了稳定表达的工程菌,建立了复性与纯化技术,为其进一步的功能与应用研究打下基础。
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