【摘 要】
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为了研究隐睾导致生精障碍的机制以及寻找影响精子发生的温度相关基因,我们利用DDRT-PCR分析了成年SD大鼠第三天隐睾与正常睾丸基因的表达差异,确认了四条有意义的EST片段,其
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为了研究隐睾导致生精障碍的机制以及寻找影响精子发生的温度相关基因,我们利用DDRT-PCR分析了成年SD大鼠第三天隐睾与正常睾丸基因的表达差异,确认了四条有意义的EST片段,其中一条EST命名为TRS1.我们利用RT-PCR技术以及Northern blot杂交分析了温度相关基因TRS1的多组织(心脏、大脑、肺、肝脏、肾脏、胰腺、脾脏和睾丸)表达情况,发现TRS1基因在睾丸组织中存在两种转录形式,一种是4.3kb左右的长转录产物,一种是2.0kb的转录产物,后者与所克隆到的基因的长度相符,RT-PCR的结果表明该基因片段在睾丸组织中的表达量明显高于其它组织.我们利用原位杂交的方法分析了TRS1在正常睾丸和隐睾中的表达定位和变化,发现该基因的表达部位主要在生精细胞,睾丸内血管壁平滑肌以及曲精细管周围的类肌细胞中也有一定的表达.根据TRS1的原位杂交结果、序列同源性比较、motif检索结果以及真核细胞系的亚细胞定位等分析,提示:大鼠TRS1基因可能作为信号传导通路上一个中间介导分子,在精子发生中起重要作用.另外,我们分析了手术诱导的隐睾症对于生精细胞凋亡及生精细胞增殖能力的影响.采用流式细胞仪对隐睾睾丸中的生精细胞进行了倍性分析,发现不同时间的腹腔温度刺激对于生精细胞凋亡具有累加效应.
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