灵芝主要活性成分的生物酶辅助提取及灵芝酸A药代动力学研究

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灵芝为传统中药中历史悠久的一味名贵药材。是“药食同源”的功能性保健食品,含有丰富的有效成分,同时也具有很强的药理活性。本研究将灵芝孢子粉、灵芝子实体分开提取,对其有效成分的生物活性进行测定。实验结果如下:(1)中心组合设计优化灵芝水溶性多糖提取工艺研究对灵芝破壁孢子粉和灵芝子实体两个部位,在单因素提取温度、提取时间、固液比下进行考察。采用中心复合设计-响应面分析方法,通过岭脊分析优化最佳提取工艺条件为:提取温度99℃、提取时间为197min、液固比为134mL/g。而灵芝子实体的最佳提取工艺条件为:最佳温度98℃、提取时间为206min、液固比为80mL/g。(2)中心组合设计优化灵芝水溶性蛋白的提取工艺研究同样对灵芝破壁孢子粉和灵芝子实体两个部位,在单因素提取温度、提取时间、固液比进行考察。通过中心复合设计-响应面分析方法,通过岭脊分析优化最佳提取工艺条件为:提取温度为94℃、提取时间为157 min、液固比为166mL/g。而灵芝子实体的最佳提取工艺条件为:提取温度为92℃、提取时间为195min、液固比为173 mL/g。(3)中心组合设计优化灵芝酸A的提取工艺研究同样对灵芝破壁孢子粉和灵芝子实体两个部位,在乙醇浓度、提取时间、液固比三个因素进行考察。利用中心复合设计-响应面分析方法,建立了超声提取灵芝酸A提取率的数学模型。从而得到灵芝子实体的回归方程的复相关系数为0.9615,方程拟合良好。通过岭脊分析优化最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为70%、提取时间41min、液固比为82mL/g。而灵芝孢子粉的回归方程的复相关系数为0.9565,方程拟合良好。最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为49%、提取时间40min、液固比为60mL/g。(4)酶辅助法提取灵芝酸A的工艺研究灵芝子实体的最佳提取工艺:漆酶1%,果胶酶3%,甘露聚糖酶5%,时间30min,40℃,pH6。在此条件下灵芝酸A的提取率为3.521%。灵芝孢子粉的最佳提取工艺:果胶酶1%,糖苷酶3%,时间30min,温度40℃,pH6。在此条件下灵芝酸A的提取率为0.5422%。(5)灵芝酸A的药代动力学研究。研究灵芝提取物的60%酒剂以及其水剂中灵芝酸A药代动力学参数。分为三个剂量组:184mg/kg、920mg/kg、1840mg/kg。血药浓度-时间曲线测定数据经3P97药代动力学程序拟合,其药代动力学模型均为两室模型。并且高、中、低剂量组的AUC与剂量呈线性关系,由半衰期T1/2beta,标准曲线下面积AUC可以看出。灵芝提取物的酒剂比水剂具有更好的药代动力学参数,因此具有更好的生物利用率。
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