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苹果黑星病是世界上重要苹果产区的主要病害之一。近几年，该病在我国部分地区有发病报道，威胁着我国苹果产业的发展。利用植物转基因技术，将对苹果黑星病具有抗性的Vf基因导入优质苹果当中，可获得对黑星病具有高抗性的优质苹果新品种，从而加快苹果抗黑星病育种的进程。
以两个苹果品种‘鲁加六号’和‘富士’的组培苗为试材，建立了高频稳定的胚状体再生体系，在此基础上初步建立了‘鲁加六号’的遗传转化体系，进行PCR初步检测获得了Vf基因转化植株。主要取得了以下研究结果：
1、确定了两个苹果品种的最佳增殖培养条件。研究表明，‘鲁加六号’和‘富士’都具有良好的增殖能力，其增殖培养的最佳培养基为：MS+BA 1.0mg/L+NAA0.2mg/L+Suc3％+Agar0.7％，pH5.8和MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+Suc3％+Agar0.7％，pH5.8。平均增殖倍数分别达到5.3和4.7。
2、获得了‘鲁加六号’和‘富士’苹果高频稳定的胚状体再生体系。确定了两苹果品种最佳胚性细胞诱导培养基为MS+BA1.0+NAA5.0+TDZ0.5mg/L。胚胎发育阶段，胚胎发育培养基为MS+BA1.0+NAA0.1，最佳暗培养时间为10d，叶片的最佳放置方式为近轴面接触培养基。叶片再生率可分别达到100％和96.7％。通过胚状体不同时期形态学组织学观察，结果显示胚状体发育时期经历原胚、球形胚、心形胚、子叶形胚、鱼雷形胚、成熟胚等不同形态阶段。同时，研究发现以1/2MS+IAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L为生根培养基，‘鲁加六号’苹果平均单根长较长且生根率较高，达86.7％。
3、初步建立了‘鲁加六号’苹果遗传转化体系，并得到了2个转化系。结果表明，叶片切伤后黑暗预培养3 d，农杆菌侵染后，共培养时间为72小时，不添加乙酰丁香酮；延迟培养阶段头孢霉素浓度为200mg/L，时间为6 d；选择培养阶段，芽分化过程卡那霉素浓度为15mg/L，生根过程卡那霉素适宜浓度为10mg/L。
4、经PCR检测表明Vf基因已整合到‘鲁加六号’苹果基因组中。采用CTAB法提取转化植株的DNA，利用人工合成引物进行PCR扩增。结果表明，外源Vf基因已整合到‘鲁加六号’苹果基因组中。