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目的:确定“胡柚宝”片剂对小鼠免疫功能的影响,考察“胡柚宝”片剂对实验小鼠的抗疲劳作用,研究“胡柚宝”片剂对小鼠的急性毒性作用,综合评估其免疫增强功能及安全性,为将其研发为新保健品提供实验基础。 方法:小鼠免疫功能实验:取 KM种小鼠,灌胃“胡柚宝”片剂溶液0.4g/kg(LD)、0.8g/kg(MD)、1.6g/kg(HD),每天1次,10d后:①剖取小鼠胸腺和脾脏,分别计算两者脏器指数;②小鼠尾静脉注射墨汁,眼眶内静脉不同时间取血,溶解于碳酸钠溶液,比色法测定吸光度,并取肝脏和脾脏,计算碳粒廓清指数;③实验结束,剖取小鼠脾脏,根据LDH法,计算NK细胞活性。 小鼠抗疲劳实验:取KM种小鼠,灌胃“胡柚宝”片剂溶液0.4g/kg、0.8g/kg、1.6g/kg,每天1次,共10天,末次给药后30min:①将尾根部负荷5%体质量铅块的小鼠投入水槽中游泳,当小鼠头部没入水面以下8秒不再上浮判定为疲劳;②将小鼠置于爬竿架,爬竿架置于水槽之上,记录小鼠跌落下竿的时间。 小鼠急性毒性实验:取KM种小鼠40只,以胡柚宝片剂最大浓度(0.8g/mL),小鼠最大灌胃体积(0.4mL/10g)灌胃给药,观察其急性毒性反应。 结果:免疫功能实验结果:①小鼠灌胃“胡柚宝”片剂后,与空白组相比,高、中、低剂量均能使脾脏指数升高,但均无显著性差异;胸腺指数为低剂量最高,与空白组相比,高、中、低剂量均能使胸腺指数升高,但均无显著性差异。②小鼠灌胃“胡柚宝”片剂后,碳廓清指数变大,其中中剂量升高27%、高剂量升高40%,与空白组相比均具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);③小鼠给药胡柚宝片剂10d后,与空白组相比,NK细胞活性增强,其中低剂量升高4%,中剂量升高7%,高剂量升高17%。与空白组相比,高剂量具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。 小鼠抗疲劳实验结果:①小鼠给药胡柚宝片剂10d后,游泳时间延长。与空白组相比,给药10d后,“胡柚宝”片剂3个剂量均能明显延长小鼠游泳时间,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.05),并呈剂量依赖性。②小鼠给药胡柚宝片剂10天后,爬竿时间延长。与空白组相比,给药10d后,“胡柚宝”片剂3个剂量均能明显延长小鼠爬竿时间,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.05),并呈剂量依赖性。 小鼠急性毒性实验结果:经半数致死量(LD50)测定的预试验,各剂量组经灌胃给药后,均未引起小鼠死亡,未能测出半数致死量(LD50);最大给药量试验以胡柚宝最大浓度(0.8g/mL),小鼠最大灌胃体积(0.4mL/10g),1天3次,灌胃给药,测得小鼠最大给药量为96g/kg(生药量400g/kg),相当于临床成人日用剂量的200倍。未见中毒症状及死亡现象。 结论:"胡柚宝"片剂对小鼠具有提高免疫作用,其机理可能通过提高小鼠胸腺和脾脏脏器系数,促进碳廓清指数和加强 NK细胞活性程度,从而有效提高小鼠免疫功能。“胡柚宝”片剂能明显提高小鼠抗疲劳能力,表现为游泳时间和爬竿时间增加。小鼠急性毒性实验表明,“胡柚宝”片剂在临床成人日用剂量的200倍情况下,无明显的毒副作用,口服安全。