弓形虫病是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种人兽共患原虫病。弓形虫可广泛寄生于包括人在内的所有哺乳动物及鸟类的细胞内，并呈世界性分布。据报道，全球约三分之一的人感染弓形虫，在我国则有约7.9％的人感染。弓形虫病对畜禽的危害也很严重。许多畜禽，如猪、牛、猫、犬、羊、马、骆驼、家兔、鸡、鸭等都可以感染弓形虫，给畜牧业造成巨大经济损失。人感染弓形虫主要通过接触环境中的水、土壤、犬猫排泄物，或者食用了未煮熟的肉中的卵囊或包囊。其中食用未煮熟的猪肉是人群感染弓形虫的一个重要来源。因此，研究猪弓形虫病的诊断方法具有重要的公共卫生学意义。　　 常用的诊断猪弓形虫病的方法有很多，包括血清学、免疫学方法和分子生物学检测法。在这些方法中，目前开发的市售产品也有很多，但部分存在缺陷，甚至有些产品在临床应用以及疾病预防控制方面容易给人以误导。因此，通过对目前市场上销售的猪弓形虫病检测产品进行对比，从中筛选出稳定性好、敏感性高、特异性强、价格适中的产品，并对缺陷产品存在的问题进行剖析，从而为新产品开发及临床应用提供一定的借鉴。　　 本研究用弓形虫PYS和RH株107个速殖子在实验室条件下感染45头30日龄健康仔猪，并分别于感染前一周、感染后两周经前腔静脉采血，分离血清。然后用目前国内外市场上常用的猪弓形虫病免疫诊断方法，即ELISA、IHA、MAT和金标试纸条，分别检测分离的血清，比较不同试剂盒检测血清抗体的效果，从而对各试剂盒的检出率、稳定性、特异性进行判断。结果显示：IHA检测试剂盒检出率普遍不高，最高只有50%，且凝集效果影响结果判定；部分进口ELISA试剂盒并不优于国产试剂盒；金标试纸条检测结果很不稳定；MAT检测方法稳定性和特异性均较好，且检出率高，达到59.2%。因此，MAT方法和质量较好的ELISA试剂盒检测结果比较理想。试验结束，解剖所有试验组和对照组的猪，取心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、淋巴结、肌肉等组织，根据弓形虫529bp特异性DNA序列设计引物，运用PCR方法检测。将PCR阳性样品的产物测序，结果均为弓形虫特异性序列。　　 本研究还对RH、TgC7、PRU、QHO、TgCxdb1等5个弓形虫虫株速殖子的毒力进行了评价。基因型鉴定RH、TgCxdb1为Ⅰ型虫株，TgC7为我国特有型，QHO及PRU为Ⅱ型虫株。除PRU虫株外，复苏以上4个虫株，于18～22g的无特定病原(SPF)的雌性KM鼠腹腔中传代。虫株速殖子数量和活力稳定后，收集小鼠腹腔液，用胰酶纯化法收集腹腔液中的速殖子，计数。每个虫株的速殖子分别按照105、104、103、102、101个速殖子的接种量分组接种。逐日观察小鼠，并隔天称重，记录小鼠发病、体重变化和死亡情况。试验结束，采集濒临死亡小鼠腹水，显微镜下观察腹水中弓形虫速殖子数量和形态。观察不到速殖子的小鼠，采取其心、肝、脾、肺、肾、脑等组织，提取DNA进行弓形虫的PCR检测。PCR检测全部阳性，所有小鼠感染成功。毒力评价结果显示：RH、TgCxdb1、QHO均为强毒株，5个级别感染量的致死率均为100%;TgC7为中等毒力株，104及以上的感染量致死率为100%，103感染量的致死率为80%;PRU为弱毒株，105和103感染量的致死率仅为20%。结果表明，部分毒株的毒力与传统界定的毒力不同，甚至发生了很大变化，应引起足够的重视。本研究对不同基因型的弓形虫虫株的毒力进行评价，证实了毒力与基因型之间的关系，即Ⅰ型RH、TgCxdb1为强毒株；特有型TgC7为中等毒力；PRU为弱毒株。这些实验结果为进一步研究这些弓形虫虫株奠定了基础。　　 总之，本研究通过对猪弓形虫病抗体检测常用方法的比较，认为猪弓形虫病临床检测采用稳定性和特异性较好的ELISA试剂盒和MAT方法最好。对RH、TgC7、PRU、QHO、TgCxdb1虫株速殖子的毒力进行了评价，Ⅰ型RH、TgCxdb1虫株及Ⅱ型QHO虫株为强毒株；特有型TgC7为中等毒力；PRU为弱毒株；但对于Ⅱ型QHO的毒力变异有待进一步研究。