【摘 要】
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第一部分:生长因子肽进行黑素细胞体外培养方法的确立及培养后细胞的生物学鉴定.目的:确立生长因子肽进行黑素细胞培养的方法并对得到的细胞进行生物学鉴定.方法:选用生长因
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第一部分:生长因子肽进行黑素细胞体外培养方法的确立及培养后细胞的生物学鉴定.目的:确立生长因子肽进行黑素细胞培养的方法并对得到的细胞进行生物学鉴定.方法:选用生长因子肽bFGF、ET-1和α-MSH加入MCDB153液中进行正常人体黑素细胞体外培养,同时观察α-MSH对黑素细胞树突形成的影响.HMB-45抗原的单克隆抗体用于标记黑素小体相关胞浆抗原,以判断得到的细胞是否为黑素细胞.利用光镜、透射电镜技术对培养得到的黑素细胞进行生长特性以及形态、结构上的观察.结论:用此方法能够在短期内得到大量增殖的黑素细胞,同时,黑素细胞保持了正常的结构和功能.第二部分:培养后黑素细胞表面HLA-DR抗原表达的研究.目的:进一步研究所选用的生长因子肽以及培养时间对正常人黑素细胞表达HLA-DR抗原的影响.方法:用HLA-DR抗原的单克隆抗体对传代后第1、2代黑素细胞进行免疫组化染色,设立同期以TPA,CT作为促分裂剂培养得到的黑素细胞为对照组.用流式细胞仪的方法测定传代后第8代黑素细胞HLA-DR抗原的表达率.结论:在该培养方法的条件下,黑素细胞表面在至少传代两代内不表达HLA-DR抗原.随着传代次数增加,HLA-DR抗原的表达率增高.
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