siRNA干扰HBV阳性肝癌细胞BubR1对癌细胞生物学行为的影响

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:UserReg
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:siRNA干扰HBV阳性肝癌细胞BubR1对癌细胞生物学行为的影响。方法:1、根据基因库中BubR1序列,由Invitrogen公司设计并提供3对不同的干扰siRNA序列。2、采用RT-PCR技术检测五株肝癌细胞(HBV阴性及HBV阳性)中BubR1mRNA表达量最高的细胞,并且作为后续试验研究对象。3、实验分为五组,采用westrn blot技术检测干预BubR1表达后其蛋白在肝癌细胞中的表达。4、采用MTT细胞增殖实验、平板克隆法、细胞流式实验检测转染3对siRNA序列沉默BubR1基因后对细胞增殖能力、克隆形成能力、细胞凋亡以及周期的影响。结果:1、RT-PCR技术检测结果显示:BubR1mRNA在乙型肝病毒阴性性肝癌细胞系中低于乙型肝炎病毒阳性肝癌细胞系中的表达,并且在HepG2.2.15中表达量最高。2、采用Western blot技术检测BubR1蛋白在正常组、阴性组、干预组的表达量,其结果显示:BubR1蛋白在正常组和阴性组表达明显高于干扰组(C、D、E)(p<0.05),差异性具有统计学意义,且干扰组E表达量最低。3、通过MTT及克隆平板实验检测干扰BubR1后细胞的生长情况、增殖及侵袭能力,实验结果显示,干扰BubR1表达后,干扰组相比正常组及阴性组生长增殖能力受到抑制,且干扰组E抑制最明显(P<0.05),具有统计学意义。另外凋亡与周期实验结果表明,干扰组与对照组(正常组及阴性组)对比,凋亡率增加,且干扰组E凋亡率最明显(P<0.05),差异具有统计学意义;与正常组及阴性组相比,干扰组S、G2期细胞增加,且干扰组E增加更明显p<0.05,差异具有统计学意义。结论:1、在体外干扰BubR1后其蛋白在HepG2.2.15细胞中表达量下调。2、在体外干扰BubR1后,HepG2.2.15细胞株的生长、增殖以及周期受影响,具体表现为:MTT增殖能力减弱,凋亡率增加,细胞周期阻滞于G2/M期。
其他文献
目的分析急性踝关节扭伤的针刺治疗效果。方法回顾分析2014年1月—2016年12月在该院诊治的98例急性踝关节扭伤患者临床资料,按治疗方式不同分2组,对照组(44例)行西医治疗,观
目的研究机会性结肠镜检查对结直肠肿瘤发现率的影响。方法选择2012年01月到2013年09月于青岛市海慈医院消化内科门诊就诊的患者,共计32694例,随机分为试验组及对照组.试验组
随着我国经济与世界经济的融合不断增强,除东部沿海的发达城市外,中国疆域的各临界省市与周边国家也开始发生大量的经济往来,不仅促进了当地经济的发展,同时在中国外贸经济的
目的:研究胃癌细胞中FTI-277对Nrf-2基因扩增及蛋白表达的影响及其对胃癌细胞增殖、凋亡的作用。方法:采用MTT法观察当实验组中加入FTI-277后对胃癌细胞增殖活性的影响;流式细胞
要使全民健身计划在学校里落到实处,除了提高教师、学生的认识之外,更重要的是要进一步加强和完善学校体育课程建设,突出“健康第一”的主题,培养学生“终身体育”的意识。
<正>为了加快我国造纸行业的发展,近年来国内各造纸企业陆续引进国外先进的造纸设备。我厂引进的高级书写纸、证券纸造纸生产线包括:备浆系统、浆料流送系统、造纸机(网前箱
会议
介绍了热轧带肋钢筋力学性能的一般规定和具有抗震性能要求的钢筋力学性能的特殊规定,阐述了抗震钢筋强屈比、超屈比和最大力总伸长率的意义和作用,结合现场钢筋原材料抽样情
20年前,朦胧诗在争论中登上诗坛,渐渐地便以挡不住的魅力征服了众多读者,造成了一个朦胧诗流行的时代。它具有无所顾忌的人格魅力,自我表现的思想魅力,含蓄幽深的艺术魅力,观念更新
国有企业综治部门在当前国有企业之中,发挥着非常重要的作用,如何将综治队伍建立完善,是本文讨论的问题。
2008年,湖北省电子信息产业持续快速发展,提前两年完成了省委、省政府制定的到"十一五"末期产业规模"过千亿"的战略目标。全行业实现销售收入1,044亿元,是2002年的7.4倍,年均增长