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背景：肝衰竭的发病机制与多种因素有关,其中免疫损伤与炎症反应起至关重要的作用。NLRP3炎性体是一类位于胞内的多蛋白复合体,由NOD样受体NLRP3、接头分子ASC及效应分子procaspase-1组成,NLRP3炎性体激活后促进caspase-1的活化及IL-1p和IL-18的分泌,参与人体的炎症和免疫反应。既往研究显示NLRP3炎性体的激活与急性肝损伤有密切关系,但其在肝衰竭发病机制中的作用尚不清楚。目的：通过观察HBV相关慢加急性肝衰竭患者(HBV-ACLF)外周血及D-氨基半乳糖和脂多糖(GalN/LPS)诱导的急性肝衰竭小鼠肝组织中NLRP3炎性体通路及CD40-CD40L相关分子的表达水平,了解NLRP3炎性体在肝衰竭发病中的表达特点,明确NLRP3炎性体表达水平与肝衰竭患者预后的相关性,并初步探讨CD40-CD40L调控NLRP3炎性体激活的可能机制。方法：(1)选取HBV-ACLF患者60例,慢性乙肝患者(CHB)20例,健康对照(HC)20例,通过荧光定量PCR方法检测三组人群外周血单个核细胞中NLRP3炎性体分子及proIL-1β的翻译表达水平并进行比较,通过ELISA方法检测三组人群血清IL-1p、IL-18分泌水平,了解NLRP3炎性体及其下游细胞因子在慢加急性肝衰竭患者中的表达特点,并将HBV相关慢加急性肝衰竭存活组与未存活组患者NLRP3炎性体表达水平进行比较并与预后分析。同时通过荧光定量PCR、ELISA方法检测三组人群外周血单个核细胞及血清中CD40-CD40L表达情况,与NLRP3 mRNA进行相关分析,了解两者有无相关性。(2)通过荧光定量PCR、ELISA、WesternBlot、免疫组化方法检测GalN/LPS诱导急性肝衰竭小鼠模型过程3h、6h及对照组的血清、肝组织的NLRP3炎性体通路及CD40-CD40L相关分子表达情况,应用Caspase-1活性检测试剂盒检测肝组织caspase-1舌化情况。结果：(1) HBV-ACLF患者外周血单个核细胞NLRP3 mRNA (63.28±51.38× 104)、ASC mRNA (395.23±141.15×10-4)、procaspase-1 mRNA (325.64±167.44× 10-4)、proIL-1β mRNA (896.80±555.55×10-4)表达明显高于慢性乙肝患者及健康人(P<0.01),并伴随血清IL-1β(4.29±2.28 pg/ml)、IL-18 (1358.17±421.29 pg/ml)水平的明显升高;HBV-ACLF患者外周血单个核细胞CD40 mRNA (65.85±46.18×10-4)高表达,CD154 mRNA(17.17±11.18×10-4)低表达；血清sCD154(201.89±114.07 pg/ml)表达明显升高,血清sCD40 (48.28±16.31 pg/ml)水平较HC组(31.28±12.45pg/ml)升高,却明显低于CHB组(78.23±19.25 pg/ml) (P<0.05); NLRP3 mRNA与CD40 mRNA显著正相关(r=0.852, P=0.000), HBV-ACLF未存活组患者外周血单个核细胞NLRP3 mRNA表达水平高于存活组(P<0.01),NLRP3表达水平与MELD评分相关(r=0.466,P=0.000),NLRP3曲线下面积0.709(95% CI 0.575-0.843)。(2) GalN/LPS诱导急性肝衰竭小鼠模型过程中造模6H组小鼠肝组织NLRP3 mRNA(5.71±1.38)、ASC mRNA(3.03±1.15)、procaspase-1 mRNA (19.75±7.44)、proIL-1β mRNA (16.80±5.55)、proIL-18 mRNA (0.76±0.34)、NF-κB mRNA (2.98±2.44)、 CD40 mRNA (35.85±6.18)、CD154 mRNA (2.16±0.72)表达水平明显高于造模3H组,并伴随caspase-1活化增加及血清IL-1β(468.29±146.28 pg/ml)、IL-18(11.01±4.79 pg/ml)分泌水平明显升高;Western Blot结果显示随着小鼠急性肝衰竭的发生发展NLRP3、caspase-1、IL-1β及CD40、CD40L蛋白表达水平逐渐升高;肝组织免疫组化显示NLRP3蛋白主要表达在肝细胞胞浆及肝窦内皮细胞中,造模6H组(肝衰竭小鼠)肝组织中NLRP3表达最强。结论：NLRP3炎性体的激活在HBV相关慢加急性肝衰竭及GalN/LPS诱导小鼠急性肝衰竭发病中起重要作用。NLRP3炎性体与病情严重程度相关,对慢加急性肝衰竭预后有一定预测作用。CD40 mRNA的表达与NLRP3 mRNA相关,但CD40-CD40L在肝衰竭的免疫发病机制中如何调节NLRP3尚需进一步研究。