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目的:通过研究胆管机械性损伤(Mechanical in jury)与电灼伤(Electric burn)中的早期微结构变化,比较开腹胆囊切除术(Open cholecystectomy,OC)和腹腔镜胆囊切除术(Laparosccopic cholecystectomy,LC)后导致胆管损伤的差异,探讨医源性胆管损伤(Surgical bile duct injury)导致胆管良性狭窄的机制。
方法:选本地健康杂交犬35只,随机分为机械性损伤组(n=15),电灼伤组(n=15),对照组(n=5),建立动物胆管损伤模型,机械性胆管损伤组模型用手术刀做胆管壁全层锐性损伤,电灼伤组胆管损伤模型采用电刀全层切开胆总管壁,然后均行粘膜对粘膜全层缝合,对照组单纯行开腹及关腹手术,模拟手术创伤环境。分别于术后1周、2周、1月取胆管损伤处标本,用免疫组化SP法检测平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin α-SMA)在各组中的表达强度,用苏木精-伊红染色法(Hematoxylin Eosin HE)在显微光镜下观察巨噬细胞(Macrophage MΦ)在三组中的数量表达,利用图像分析系统定量分析三组中的阳性细胞数,并进行统计学分析、比较。
结果:1.α-SMA在正常胆管壁中表达于少量平滑肌组织,在机械性损伤组及电灼伤组胆管损伤模型中表达于肌成纤维细胞(Myofibroblast MFB)胞浆与平滑肌组织中。统计结果显示:机械性损伤组胆管损伤模型中各时期α-SMA表达强度均强于对照组(P<0.05);电灼伤组胆管损伤模型中各时期α-SMA表达强度均强于对照组(P<0.05);电灼伤组各时期α-SMA表达强度均弱于同期机械性损伤组(P<0.05)。2.巨噬细胞在机械性损伤组及电灼伤组胆管损伤模型中表达于胆管粘膜固有层及粘膜下层。统计结果显示:机械性损伤组与电灼伤组胆管损伤模型中,电灼伤组各时期MΦ表达强度均弱于同时期机械性损伤组(P<0.05)。
结论:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与巨噬细胞(MΦ)在胆管损伤后愈合过程中的高表达是导致成纤维细胞与肌成纤维细胞增殖旺盛,细胞外基质过度沉积,瘢痕增生的重要因素。电灼伤导致胆管损伤后,其愈合周期较机械性损伤可能偏长。