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DNA由于不断遭受来自外界环境和细胞内各种因素的伤害,产生各种不同类型的损伤。其中,DNA双链断裂(Double-strand breaks,DSBs)损伤是最为严重的损伤类型之一,如果不能被正确修复将会导致基因突变,基因组不稳定性以及细胞死亡。根据DSBs末端的性质,DSBs可以被分为两类--双末端DSBs(Two-ended DSBs)和复制相关的单末端 DSBs(Replication-associated one-ended DSBs)。双末端 DSBs一般由外源性因素如X射线和γ射线等造成;而复制相关的单末端DSBs则主要由诱导复制叉停滞或崩解的化学药物造成。DSBs主要由非同源末端连接(Non-homologous end joining,NHEJ)和同源重组(Homologous recombination,HR)两种修复方式进行修复。NHEJ修复是一个相对快速的过程,直接通过DNA连接酶把两个断裂的DSBs末端连接起来。NHEJ修复相比,HR修复是一个多步骤的复杂过程。HR修复的发生需要DNA末端切割产生3’单链DNA,这一过程依赖于CtIP-MRN(Mre11-RAD50-NBS1)蛋白复合物。单链DNA 一旦产生会迅速被单链DNA结合蛋白RPA包被。接下来,重组酶RAD51置换RPA形成RAD51-单链DNA核酸蛋白纤维。这种核酸蛋白纤维结构催化同源序列的寻找,3’DNA入侵以及DNA新链合成和连接等多个过程。越来越多的证据表明,双末端DSBs既可以由NHEJ修复也可以由HR修复,其中以NHEJ修复为主。而复制相关的单末端DSBs则只能通过HR完成修复。一旦来自不同染色体上的单末端DSBs通过NHEJ修复则会导致染色体易位和基因组不稳定。然而细胞如何区分双末端DSBs和复制相关的单末端DSBs并选择合适的方式对它们进行修复依然还很不清楚。在我们的研究中,我们用亲和纯化的方法分离CtIP复合物,并通过质谱测序鉴定出一个新的CtIP结合蛋白--AUNIP,并阐明AUNIP在DSBs修复方式选择的过程中的重要功能。一方面,AUNIP可以直接和DNA末端切割过程中的关键蛋白CtIP相互作用。另一方面,AUNIP具有DNA结合能力并且优先结合类似于停滞复制叉结构的DNA底物。它的DNA结合能力对于AUNIP本身的招募和CtIP的招募以及CtIP依赖的DNA末端切割过程都是必需的。相应地,AUNIP的缺失会导致细胞对诱导DSBs产生的药物尤其是诱导复制相关单末端DSBs产生的药物高度敏感。我们的结果表明,AUNIP可以通过促进CtIP在复制相关的单末端DSBs位点的聚集,进而促使复制相关的单末端DSBs通过HR修复途径进行修复,维持基因组的稳定性。