天南星和虎掌南星饮片质量标准及其有机酸部位的研究

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天南星(Arisaematis Rhizoma)为天南星科(Araceae)天南星属(Arisaema Mart.)植物天南星·(Arisaema erubescens (Wall.) Schott.)、异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume.)、东北天南星(Arisaema amurense Maxim.)的干燥块茎,味苦、辛,性温,有毒,归肺、肝、脾经。具燥湿化痰,祛风止痉,散结消肿。用于顽痰咳嗽,风痰眩晕,中风痰壅,口眼歪斜,半身不遂,癫痫,惊风,破伤风。生用外治痈肿,蛇虫咬伤。虎掌南星(Rhizoma Pinelliae Pedatisecta)为天南星科(Araceae)半夏属(Pinellia Tenore)植物掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott.)的块茎,味苦、辛,性温,有毒,归肺、肝、脾经,具有降逆止呕、燥湿化痰、祛风定惊、消痞散结等功效。始载于《神农本草经》,迄今尚未收载于《中国药典》,目前个小者常作半夏,而大多作天南星的主流商品使用,自古使用多混乱。临床多用于治疗顽痰咳嗽、胸隔胀闷、眩晕、中风、口眼歪斜、癫痈及破伤风等,生用治疗痈肿,蛇虫咬伤。本论文研究了生天南星和生虎掌南星饮片炮制工艺,并参照《中国药典》饮片质量标准有关条款,分析了天南星和虎掌南星饮片性状、鉴别、检查、浸出物及含量,研究建立了指纹图谱,起草了饮片质量标准(草案);分析了天南星和虎掌南星有机酸部位就成分、研究建立了含量测定方法及分离方法,并进行了体外细胞毒试验与影响NO水平实验。论文主要内容有以下几个方面。1.文献研究论文就天南星和虎掌南星在资源分布、品种鉴别、化学成分、含量测定、药理药效以及临床使用等方面进行了综述。资料显示,天南星和虎掌南星药用历史悠久,为常见有毒中药,自古使用多混乱;现代研究表明具有抗肿瘤作用,但其有效成分和机理尚不清楚。2.饮片质量标准研究(1)饮片加工工艺以浸出率、总黄酮含量与总有机酸含量为指标,考察了切制、干燥工艺,建立了对鲜品直接横切、对干燥药材浸润软化后横切,切制成厚片后干燥。(2)质量标准论文通过对天南星和虎掌南星饮片各12批次,从性状、鉴别、检查、浸出物和含量测定等方面的分析、及指纹图谱的研究,起草了天南星和虎掌南星饮片质量标准(草案)。3.有机酸部位的研究(1)有机酸组成的分析应用GC-MS技术,甲酯化分析饮片中有机酸成分,经NIST2010标准谱库检索了 41个有机酸成分,其中一元酸有29个,二元酸有9个,三元酸有3个;饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸约占总峰面积的63.5%和36.5%,以柠檬酸占总峰面积的31.6%为最。(2)总有机酸含量测定法研究利用羧基在N,N-二环己基碳酰亚胺(DDC)体系中与高氯酸羟胺(HAP)形成羟肟酸,产物在酸性条件下与高氯酸铁显色的原理,采用分光光度法,建立了测定其总有机酸含量的方法,经方法学考察,吸光度值与浓度呈现良好的线性关系,r=0.9998,平均加样回收率为99.91% (RSD=1.32%,n=9),符合含量测定要求。(3)有机酸部位分离方法研究以现代分析仪器为导向,考察了不同树脂对天南星与虎掌南星中有机酸部位的分离效果,建立了以HB16去黄酮成分,阴离子交换树脂D315分离有机酸部位的方法。(4)有机酸的抗肿瘤作用以MTT法进行了体外细胞毒实验,结果显示有机酸部位对肺癌A-549、肝癌SMMC-7721与肝癌HepG2的抑制作用显著,且其抑制率与剂量呈正相关,且与总有机酸含量亦成正相关;能显著提高细胞内NO水平,提示与抗肿瘤作用具有相关性。
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