刺激隐核虫诱导的石斑鱼免疫保护研究

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刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)是目前经济鱼类养殖业较为普遍和危害性较大的寄生性纤毛虫,主要感染鱼皮肤和鳃,引起海水鱼类的“白点病”,近年来给海水养殖业造成了巨大的经济损失。本论文首先调查研究广东地区刺激隐核虫不同地理株之间血清型,为刺激隐核虫疫苗的研制及其应用提供一个科学的依据。其次以斜带石斑鱼和刺激隐核虫为研究对象,通过刺激隐核虫免疫斜带石斑鱼,并观察斜带石斑鱼产生的免疫保护及其保护期,为最终疫苗的有效性提供一个可靠的依据,因此具有重要的理论意义和应用前景。  本论文调查地点为粤东(饶平)、粤南(茂名电白)和粤中(大亚湾、广州龙穴岛)等地,定期进行水质与鱼病情况检测,观察刺激隐核虫的发病季节,并带回样品进行实验室传代保存,以便深入分析。  对收集到的不同地理株的刺激隐核虫样品进行实验室隔离培养,并进行海水鱼(斜带石斑鱼)的免疫,定期(每周)抽取免疫鱼的血液,制备血清,进行相互交叉阻动实验及攻毒实验,检测刺激隐核虫的血清型。结果显示,无论用哪个地理株免疫的石斑鱼,其血清和皮肤培养液中都可以产生抗体,不仅使本株幼虫产生阻动反应,也可以阻动其他地理株的幼虫。结果表明,地理株相差甚远的广东电白、饶平和大亚湾之间的刺激隐核虫没有血清学差异性。  以斜带石斑鱼作为研究模型,以刺激隐核虫作为抗原免疫石斑鱼,定期抽血,分离血清检测阻动效价,同时通过小部分免疫鱼进行攻毒实验,检测石斑鱼的保护期。结果发现,初次免疫后2周,鱼体内血清的阻动效价开始升高,二免后两周达到最高,同时攻毒(初免第4周)发现此时的免疫保护率为100%,阻动效价最高值维持一段时间后略有下降,免疫保护率也跟随着有所下降,在初免后18周,膜蛋白的保护率为0,而此时幼虫免疫还仍有20%的保护率。因而此疫苗具有一定的应用性。
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