泡球蚴囊液对大鼠肝星状细胞MAPK信号通路影响的初步研究

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目的探讨泡球蚴囊液对大鼠肝星状细胞丝裂素活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinas,MAPK)信号通路的影响。方法采用大鼠肝星状细胞HSC-T6与不同蛋白浓度的泡球蚴囊液共培养,共11组,浓度分别为13.5mg/mL的泡球蚴囊液原液,6.8mg/mL、3.4mg/mL、1.7mg/mL、0.9mg/mL、0.4mg/mL、0.2mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.025mg/mL、0.01mg/mL。培养24h后收集细胞,同时收集对照组(无泡球蚴囊液干预)细胞。利用荧光实时定量PCR检测ERK1/2、JNK1/2和p38MAPK的变化。结果泡球蚴原囊液与HSC共培养24h后大部分细胞发生固缩,呈脱落前兆;1/2原囊液组部分细胞固缩,呈脱落前兆,而部分HSC-T6细胞收缩成长梭形,细胞生出许多细长的伪足,是正常状态的2倍以上;1/4原囊液组部分细胞呈收缩的长梭形,生出许多细长的伪足,但大部分细胞仍呈现为贴壁的胞体较大的不规则多边形,且伸出较短的伪足与其他细胞连接成片状;1/8原囊液以下组与空白对照组细胞从形态上则无差异。实时荧光定量检测显示ERK1/2、 JNK1/2和p38MAPK mRNA水平在泡球蚴囊液>0.4mg/mL时显著增加,在6.8mg/mL时相对于对照组高表达,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论不同浓度泡球蚴囊液均可通过与大鼠肝星状细胞表面受体结合激活大鼠肝星状细胞MAPK信号通路,其中浓度为6.8mg/mL的泡球蚴囊液干预结果较为显著。
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