本研究以多年生黑麦草（Lolium perenne L．）的三个品种：特拉华（Delaware）、尤文图斯（Juventus）和托亚（Taya）为研究对象，选用成熟胚和成熟种子为外植体，对植物激素和其它营养成分等因素设计多个浓度水平，探讨其对愈伤组织诱导和分化的影响，以及再生体系建立中的褐化、白化等问题。研究结果表明： 1．成熟胚在愈伤组织的诱导率、生物量及质量方面均较优于成熟种子，但成熟种子接种操作简单易行，而胚根、胚根诱导效果较差。 2．在愈伤组织的诱导率、生物量、褐变死亡率、愈伤质量以及愈伤分化率方面的表现高低依次为：特拉华＞托亚＞尤文图斯 3．2，4-D浓度在2～4mg／L之间有利于成熟胚诱导愈伤组织，7mg／L有利于成熟种子诱导愈伤组织。6-BAP浓度0.025mg／L时成熟胚诱导的愈伤组织在诱导率、增殖能力和胚性愈伤比例方面均较高，成熟种子为外植体时适宜浓度为0。成熟胚的出愈率最高为D（98％），J（68％），T（72％），成熟种子的出愈率最高为D（75％），J（40％），T（7096）。 4．6-BAP对愈伤组织的分化有显著影响，0mg／L利于成熟胚诱导的愈伤组织分化，最高分化率分别为D（90.9％），J（69.2％）；0.1～0.3mg／L利于成熟种子诱导的愈伤组织分化，最高分化率分别为D（87.0％），J（43.3％），T（95.0％）。NAA、ZT、Cu²⁺对愈伤组织的分化都有一定的促进作用。 5．正交试验优化了成熟种子的愈伤组织诱导与分化培养基： Delaware：2，4-D（7mg／L）+6-BAP（0.1mg／L）+NAA（0.3mg／L）+CaH（0.1g／L）（诱导），6-BAP（0、0.1或0.3mg／L）+NAA（0.4mg／L）+ZT（0.1mg／L）+Cu²⁺（8.96mg／L）（分化）。 Juventus：2，4-D（7mg／L）+6-BAP（0）（诱导），分化培养基有待增设因素及浓度继续摸索。 Taya：2，4-D（7mg／L）+6-BAP（0）（诱导），6-BAP（0.2 mg／L）时愈伤组织分化率最高。 6．通过在愈伤组织分化阶段加入活性炭和水解乳蛋白，将愈伤组织分化率提高达2％左右，褐变死亡率降低达10～18％。