目的:探讨雷氏大疣蛛毒素对HeLa细胞增殖的抑制作用途径及其可能的分子机理。　　方法:细胞形态学观察和分子生物学检测方法是研究抗肿瘤药物药理学的重要手段。本研究首先运用台盼蓝拒染法筛选出四种蜘蛛毒素中对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用最强的是雷氏大疣蛛毒素。MTT方法测定其IC50。通过淋巴细胞转化实验和乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测雷氏大疣蛛毒素(10，20，40μg/mL)对HeLa细胞的作用途径。通过倒置相差显微镜观察法，HE染色法，AO/EB双荧光染色法，扫描电镜和透射电镜观察实验前后HeLa细胞的形态学变化。通过[3H]-TdR掺入法、流式细胞仪(FCM)、DNA琼脂糖凝胶电泳检测雷氏大疣蛛毒素对HeLa细胞DNA合成、细胞周期分布、细胞凋亡率、坏死率和DNA结构的变化。通过RT-PCR方法和Western blot方法检测调控细胞周期相关基因p21和细胞凋亡信号途径相关基因caspase-3基因mRNA表达和蛋白表达的变化。动物实验评价雷氏大疣蛛毒素体内抗肿瘤药理作用。　　结果:雷氏大疣蛛毒素在四种蜘蛛毒素中对HeLa细胞增殖的抑制最强。雷氏大疣蛛毒素对HeLa细胞的IC50是13.9μg/mL。雷氏大疣蛛毒素（10，20，40μg/mL）对淋巴细胞的增殖反应无刺激作用。实验组HeLa细胞经检测LDH释放率增加，呈浓度和时间依赖关系。形态学观察实验组HeLa细胞发生了明显的凋亡和坏死特征。雷氏大疣蛛毒素明显抑制HeLa细胞DNA的合成，呈浓度和时间依赖关系。实验组HeLa细胞的细胞周期发生了明显改变，G0/G1期细胞增多，S期细胞减少，G2/M期细胞减少，细胞周期被阻滞到G0/G1期(P＜0.05)。实验组HeLa细胞在5h和15h后细胞凋亡率和坏死率比对照组明显增多(P＜0.05)。DNA电泳图谱中梯形条带不明显，出现DNA弥散状条带。p21WAF1基因和caspase-3基因与内参照GAPDH比较，mRNA表达变化都不明显（P＞0.05），P21蛋白表达也没有变化，但是Caspase-3蛋白表达上调(P＜0.01)。动物实验显示，雷氏大疣蛛毒素使荷瘤裸鼠瘤体积减小，瘤重量减轻(P＜0.01)，抑瘤率增加。对荷瘤裸鼠的体重和主要脏器没有明显影响（P＞0.05）。　　结论:雷氏大疣蛛毒素抑制HeLa细胞增殖可能通过诱导细胞凋亡和细胞坏死两种途径，Caspase-3蛋白表达上调;通过直接杀伤荷瘤裸鼠的肿瘤细胞而抑制肿瘤生长。