下丘脑ROS对5-羟色胺抑食效应的调控机制

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下丘脑ROS水平对动物的采食行为具有重要的调控作用。5-HT既是经典的神经递质,也是体内重要的抑食因子,迄今对5-HT的抑采食效应是否与下丘脑ROS水平相关尚不清楚。为研究下丘脑ROS水平能否以及如何调控5-HT的抑采食效应,本试验选择6-7周龄雄性小白鼠,采用脑室注射法,分别注射5-HT、ROS清除剂Trolox、NADPH氧化酶抑制剂Apocynin,在分析采食量变化的基础上,检测下丘脑ROS水平以及抗氧化指标,并采用荧光定量PCR和Western Blot检测了采食相关基因的表达。  研究结果表明:  (1)脑室注射0.65μg5-HT3 h后,采食量显著降低;高剂量的Trolox(0.5μg/只)、Apocynin(0.825μg/只、1.65μg/只)显著提高小鼠采食量;Trolox(0.075μg/只)、Apocynin(0.165μg/只)均能逆转5-HT的抑食效应。  (2)脑室注射5-HT显著提高下丘脑ROS水平,Trolox、Apocynin均能逆转5-HT引起的ROS上升效应。  (3)脑室注射5-HT显著提高MDA和GSH-Px活性、降低SOD活性;单独注射Apocynin以及与5-HT共注射均显著提高GSH-Px活性;Trolox和Apocynin均能逆转5-HT引起的MDA上升、SOD下降效应。  (4)脑室注射5-HT显著上调UCP-2、下调UCP-3 mRNA表达水平,Trolox以及Apocynin均能逆转由5-HT引起的UCP-2 mRNA表达量上调及UCP-3 mRNA表达量下调的效应;注射5-HT显著上调POMC mRNA表达量并有下调NPY、AgRP mRNA表达量的趋势,NPY和POMC蛋白表达与基因表达趋势一致;注射Trolox对上述基因、蛋白表达量的影响与5-HT相反;注射Apocynin有提高NPY及降低POMC蛋白表达的趋势。  综上所述,5-HT的抑食效应可通过提高下丘脑ROS水平实现,且下丘脑ROS水平的变化是建立在NADPH氧化酶活性改变的基础上。
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