白介素26在类风湿关节炎中的研究

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目的:检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者及正常对照组人员血浆白介素26(interleukin-26,IL-26)的浓度,比较类风湿关节炎组与正常对照组间白介素-26水平,同时分析类风湿关节炎患者白介素26水平与其类风湿因子、C-反应蛋白、血沉的相关性,探讨类风湿关节炎发病机制及疾病活动与血清中白介素-26水平的关系。方法:准备血浆白介素26ELISA法检测试剂盒:白介素-26EUSA检测试剂盒中所包含试剂:标准品、标准稀释缓冲液(直接使用)、人白介素-26抗体包被板、生物素标记的anti-IL-26(直接使用)、链霉亲和素、辣根过氧化物酶(HRP)(100×),链霉亲和素、辣根过氧化物酶稀释液(直接使用)、浓缩洗涤液(25×),显色液、终止液;准备主要仪器及分析软件:低温离心机、水平摇床、全自动酶标仪、数字显示隔水式电熟恒温培养箱、-40℃冰箱、酶标仪分析软件;按照ELISA试剂盒说明书进行操作,简要流程如下:(1)融化冻存血浆标本;(2)配置标准品(3)按照说明书在酶标板中加入各浓度标准品及50ul血浆;(4)在上述加入标准品及血浆的酶标孔中分别加入标记的白介素-26抗体100ul并密封孔板;(5)室温孵育60min;(6)反复洗涤冲洗4遍后,用吸液纸吸干;(7)加入辣根过氧化物酶液,并密封孔板;(8)室温孵育半小时;(9)反复洗涤冲洗4遍后,用吸液纸吸干;(10)加入显色液并封闭孔板;(11)暗室常温孵育半小时;(12)加入终止液;(13)将孔板放入酶标仪中,用450nm波长检测各孔OD值,以OD值设为纵坐标,然后以标准品浓度设为横坐标,调整到检测标准曲线后检测得到结果。分别测定56名类风湿关节炎患者和30名正常对照组人员血清中的白介素-26的浓度。同时常规实验室检测红细胞沉降率、C-反应蛋白、类风湿因子,分析白素-26水平与类风湿关节炎的发病和类风湿关节炎患者血清学指标之间的关系。结果:(1)本研究共纳入类风湿关节炎患者56例,正常对照组30例,两组间男女性别比及年龄差异均无统计学意义(P>0.1)(2)类风湿关节炎患者血清中白介素26水平为(321.425士291.594)pg/ml,正常对照组血清中白介素-26水平为(12.3542士8.2561)pg/ml,类风湿关节炎患者血清中白介素-26水平显著高于正常对照(t=-4.126p<O.001),差异有统计学意义.(3)将白介素-26浓度与类风湿因子、C-反应蛋白、血沉分别进行秩相关检验,统计检验结果显示类风湿关节炎患者的白介素-26血清浓度与其的类风湿因子、C-反应蛋白、血沉无相关性(P>0.2)。结论:活动期类风湿关节炎患者外周血中自介素-26水平明显高于正常对照组,但类风湿关节炎患者外周血中自介素-26水平与类风湿关节炎患者的类风湿因子、C-反应蛋白、血沉无明显相关性。白介素-26参与类风湿关节炎的病理发病过程,可能对类风湿性关节炎构成一个有前途的靶向治疗
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