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目的:探讨尿酸诱导肾小管上皮细胞上皮-间充质细胞转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。为防治肾小管上皮细胞EMT提供有效干预靶点。方法:本研究以人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)为研究对象,尿酸为处理因素,采用不同质量浓度的尿酸预孵育HK-2细胞48 h,通过倒置显微镜观察尿酸对HK-2细胞形态的影响;Western blot检测间充质细胞标志物Fibronectin、α-SMA和上皮细胞标志E-cadherin的表达变化,并观察尿酸对TLR4/NF-κB信号通路的影响;Real-time PCR检测炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-αmRNA的表达变化;用小干扰RNA抑制TLR4的活化,Western blot检测磷酸化NF-κB、α-SMA表达变化;用NF-κB的特异性抑制剂PDTC抑制NF-κB的活化,Western blot检测Fibronectin、α-SMA及E-cadherin的表达情况,采用免荧光染色,共聚焦显微镜观察上皮细胞标志物cytokeratin和间充质细胞标志物vimentin的表达变化。结果:与正常对照组比较,15 mg/dL的尿酸处理HK-2细胞48 h后,HK-2细胞间隙增大,呈长梭形改变,且随着尿酸质量浓度的增加,HK-2细胞形状变化越来越明显。间充质细胞标志物Fibronectin、α-SMA表达明显升高,而上皮细胞标志物E-cadherin的表达明显下降(P<0.05)。同时,高浓度尿酸诱导HK-2细胞的炎症因子IL-1β、TNF-α的表达升高(P<0.05),而IL-6有增加趋势,但无统计学意义(这可能与尿酸作为的剂量及时间有关);TLR4与p-NF-κB的表达也明显升高。小干扰RNA抑制TLR4的活化可以显著抑制尿酸引起的磷酸化的NF-κB和α-SMA表达增加(P<0.05);同时PDTC预处理可以显著抑制尿酸引起的Fibronectin、α-SMA表达明显升高(P<0.05),免疫荧光结果显示:尿酸组vimentin较对照组表达明显升高,而cytokeratin表达显著下调,相反,PDTC预处理组vimentin较对照组表达明显下降,而cytokeratin表达显著上升。结论:高尿酸可能通过活化TLR4/NF-κB信号通路诱导肾小管上皮细胞EMT的发生,靶向干预NF-κB信号通路可以显著抑制尿酸诱导的肾间质纤维化。