【摘 要】
：
本实验室在武汉大学土壤中分离得到一株普通高温放线菌CDF（Thermoactinomyces vulgaris CDF）,能够在高温条件下降解完整羽毛并将其降解产物用于自身生长需求,在皮革加工、洗涤剂生产等行业和环境保护方面具有一定的应用价值。通过三代测序的方法对普通高温放线菌CDF基因组进行测定,并对其蛋白酶编码基因进行预测分析,共鉴定到92个编码蛋白酶的基因,其中包括16个胞外蛋白酶的基因,2
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（31470185和31770072）
论文部分内容阅读
本实验室在武汉大学土壤中分离得到一株普通高温放线菌CDF（Thermoactinomyces vulgaris CDF）,能够在高温条件下降解完整羽毛并将其降解产物用于自身生长需求,在皮革加工、洗涤剂生产等行业和环境保护方面具有一定的应用价值。通过三代测序的方法对普通高温放线菌CDF基因组进行测定,并对其蛋白酶编码基因进行预测分析,共鉴定到92个编码蛋白酶的基因,其中包括16个胞外蛋白酶的基因,25个跨膜蛋白酶的基因以及51个胞内蛋白酶的基因。高温放线菌CDF中具有丰富的蛋白酶资源,尤其是胞外蛋白酶具有很大的应用潜力。我们采用明胶印迹的方法对CDF菌株的胞外培养液组分进行蛋白酶酶谱分析,鉴定到4种具有明胶水解功能的蛋白酶,其中3种蛋白酶分别为本实验室前期的研究对象:蛋白酶C2、TS-GSE和Als。通过对比CDF菌株对数生长时期和稳定期的胞外蛋白酶组分,发现有一种蛋白酶仅在CDF菌株的对数生长期存在,而在稳定期时不被表达。推测该蛋白酶在CDF菌株的生长过程中发挥重要的生理功能。经质谱检测确定其为M6家族金属蛋白酶,命名为Tv M6。从普通高温放线菌CDF基因组中克隆获得蛋白酶Tv M6编码基因,构建重组质粒并转化入大肠杆菌中进行表达,Ni2+-NTA亲和层析纯化获得不具备蛋白水解活性的Tv M6前体形式,并对Tv M6前体的加工方式进行探究。结果显示,Tv M6前体能够通过自加工的方式加工形成具有蛋白酶活性的中间体形式,但需要其他蛋白酶对其进行异源加工才能进一步形成成熟酶。通过Ni2+-NTA亲和层析纯化获得Tv M6成熟酶纯酶并对其性质进行表征,结果显示:Tv M6成熟酶最适反应温度为65℃、最适p H为7.0-7.5;具有较好的稳定性,在55℃高温条件下保温8小时仍可以保持80%的活性;钙离子能够提高Tv M6成熟酶的稳定性而氯化钠则会导致Tv M6成熟酶稳定性降低。Tv M6成熟酶在保温过程中会进一步加工形成具有两个相互作用的多肽链,并能够通过分子间作用力形成具有蛋白水解能力的结构。通过对蛋白酶Tv M6生化性质的研究,有利于开发更多的蛋白酶资源,同时为研究蛋白酶Tv M6在普通高温放线菌CDF生长过程中发挥的生理功能打下一定的基础。
其他文献
相对于唐代和两宋诗学,金元诗学在文学史上关注者较少,元好问即代表金元诗、词、文的最高成就。他“救蔽起衰”,一改南宋诗歌理趣多而情韵少的弊端,宗唐尊宋,转益多师,开金源一代诗风,在文学史上具有重要意义。其诗歌理论以早期的《论诗三十首》为代表,集大成于晚年所作的《杨叔能小亨集引》,论诗思想不断发展,对金元及明清诗坛都产生了极大的影响。从整体上看,元好问区别泾渭、疏凿微旨,论诗以“诚”为本,尚“雅正”,
“整本书阅读”是中国古代最主要的教育方式,新文化运动后白话文兴起,语文教材由单篇课文组成。上个世纪20年代,叶圣陶先生最先提出“整本书阅读”思想,但是由于诸多因素限制,整本书阅读教学并没有具体实施。随着课程改革的不断深入,教育者逐渐认识到阅读对于提升学生的核心素养的重要性,整本书阅读开始受到关注,一些教育研究者和一线教师对整本书阅读进行了探索。2017年,教育部颁布《普通高中语文课程标准》,并提出
文本解读作为中小学语文教学的基石,是语文教师课堂教学优劣的重要评判依据,牵引着课程改革的纵深点。文本解读促发着语言文字的运用、体验与生成,是激活个性化语言文字表达的重要渠道,是活生生的教师引领着活泼泼的学生在丰富的课堂活动中多元对话、共同体验、相互成长的深度学习的“铁门槛”,不断创生着教育的意义。本文以顺应理论指导下的文本解读策略体系为理论依据对文本解读进行具体研究,论文主体分三个部分展开论述:第
习近平在沿海地区工作时对海洋有着深刻的认识，形成了一系列关于海洋的重要论述。习近平关于海洋的重要论述是将马克思主义哲学的基本原理与中国海洋事业实践相结合的典范，其中关于海洋经济、海洋文化、海洋生态、海洋合作和海洋权益的论述充分反映了马克思主义哲学的唯物论、辩证法、认识论思想内涵，是指导我国推进海洋强国建设的重要理论。
康有为（1858-1927）是中国近代著名的思想家和政治活动家,他不仅组织和参与了轰轰烈烈的维新变法运动,而且留下了700万余字的浩繁著述。除了在当时影响颇大的论著《新学伪经考》《孔子改制考》等,还有不少阐释先秦儒家典籍的著作,如《孟子微》《论语注》《中庸注》等等。其中,《孟子微》乃康有为研究孟学之代表作,康氏推崇《孟子》,因其认为唯孟子得孔子之真义,他试图以自己所了解的近代西方自然科学知识和民主
在本文中,我们将在一致度量下证明由分数布朗单驱动的随机微分方程和由可乘噪声驱动的球面上的随机热方程的传输不等式.具体结构如下:在第一章中,我们介绍了传输不等式的定义和研究背景,引入了目前针对随机（偏）微分方程的传输不等式的众多研究成果.在第二章中,我们证明了由分数布朗单驱动的随机微分方程的传输不等式.在前两节中,我们介绍了分数布朗运动与分数布朗单的基本性质和研究背景,并证明了方程解的存在唯一性;在
为制备出一种耐高温、抗氧化、轻质的电磁屏蔽材料,本文以活性炭纤维毡(ACF,5.5×10-2g/cm~3)为原料,首先研究了氩气气氛高温热处理温度对ACF的微观结构和电磁屏蔽性能的影响;其次,通过硅蒸发反应沉积法对ACF进行Si C改性,研究了不同温度下Fe催化剂对ACF微观结构的影响;最后研究了高温氧化对Si C改性ACF电磁屏蔽性能的影响。结果表明:随着热处理温度（1200℃～1600℃）的增
显花植物具有多样的性系统,其中两性花植物占到被子植物总数的70%以上,其它性别分离的性系统少见,例如雄花两性花异株极为罕见。有人提出了“一石两鸟”的假说来解释花植物在自然选择中的优势,即传粉动物一次成功的访花可将同种花粉带到两性花的柱头上,同时又可将花粉成功带出,同时实现雌、雄两性生殖功能。遗憾的是,至今人们对雄全同株（同一植株上既有雄花又有两性花）的适应意义仍不清楚。为探究雄花两性花同株植物的适
全面预算管理是现代企业进行内部控制与管理的重要手段,利润收入等财务指标是在企业预算经常见到的,在公司管理、监督与内控等方面有着重要意义。经济全球化大潮席卷全球,企业间的商业竞争日益激烈,传统的将利润最大化视为终极目标的预算管理模式已面临淘汰,其关注点的时效不足与缺乏战略性的弊端逐渐显现出来,导致企业发展步伐缓慢。基于此,开发一种全新的预算管理模式的迫在眉睫,一些研究人员将发展点看向了EVA价值管理