研究背景及意义:口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma OSCC)是目前口腔疾病中较为常见并且疾病发病率较高的恶性肿瘤,其发病机制涉及DNA序列的不可逆性改变,这些改变包括由基因缺失、基因扩增及基因变异所引起的致癌基因的活跃和抑癌基因的沉默。目前关于OSCC的治疗方法,主要提倡包括手术治疗、放射治疗和化学治疗在内的综合治疗方式。而针对于OSCC的相关流行病学研究发现晚期OSCC患者的5年生存率远远低于50%,可是令人惊讶的是早期OSCC患者的5年生存率远远高于70%,因此,OSCC的早期诊断对提高其疗效至关重要。近年来有学者研究证明eya转录共激活磷酸酶4(eyes absent 4,eya4)基因的高甲基化与众多恶性肿瘤的发生发展相关。eya基因家族,因其羧基末端C末端编码2 7 1个氨基酸的保守结构域eya而得名,其蛋白结构均包括高度保守的羧基末端及多变的氨基末端。高度保守的羧基末端在eya家族中发挥着重要的作用,其中之一便是eya4基因的羧基末端能与Six1结合。目前研究发现在肺癌、结直肠癌、肝细胞癌等多种癌症的发生发展过程中都存在着eya4基因及蛋白的异常表达,这一现象暗示了 eya4基因可能在某些恶性肿瘤中起到不可或缺的调控作用。然而遗憾的是目前关于eya4蛋白与OSCC恶性肿瘤之间关系的报道相对较少,因此本研究检测了 eya4在不同分化程度的OSCC癌变组织及正常组织中的蛋白表达情况,并探讨其表达意义。实验目的:研究eya4蛋白在高、中、低三种不同分化程度的口腔鳞癌组织以及正常口腔粘膜组织中的表达情况是否具有明显区别,并且研究eya4蛋白的表达情况与OSCC是否伴有淋巴结转移有无明显关系。其次研究eya4蛋白的表达与OSCC患者的性别、年龄的相关性。从分子水平评价该基因蛋白对OSCC疾病诊断以及预防治疗的意义。实验方法:收集吉林大学口腔医院口腔颌面外科以及口腔黏膜病科自2016年起至2017年中,手术切除或病理切取的OSCC组织共60例,根据WHO病理分型:高、中、低分化OSCC各20例作为病例组,且所有患者术前均未接受化疗、放疗、生物治疗或其他特殊治疗;其中20例正常的口腔黏膜组织(NOM)被选作为对照组。实验采用免疫组织化学染色(Immunohistochemistry,IHC)的方法检测不同组织中eya4蛋白的表达情况,比较eya4蛋白在不同癌变组织及正常组织间的表达情况。实验所测得的数据通过SPSS进行统计学分析,并通过χ2检验对比各组之间是否具有显著差异性,并以P<0.05作为显著差异性的衡量标准。实验结果:1、eya4蛋白在NOM中呈高表达状态,而在OSCC组织中其表达水平较NOM低(P<0.05)。2、随着OSCC恶性程度的增高及分化程度的降低,eya4蛋白的表达量亦明显下降趋势(P<0.05),特别是在低分化的OSCC癌变组织中,eya4蛋白的表达量最低。3、eya4蛋白的表达量与OSCC是否伴有淋巴结转移具有明显的相关性,结果显示在伴有淋巴结转移的的OSCC组织中eya4蛋白的表达量明显低于不伴有淋巴结转移者,且二者具有显著差异性(P<0.05)。4、eya4蛋白的表达情况与OSCC患者的性别(男/女)、年龄无明显相关性(P>0.05)。实验结论:在本研究中,我们比较了正常口腔黏膜组织以及高、中、低三种不同分化程度的OSCC组织中eya4蛋白的表达情况,研究发现,eya4蛋白的表达与OSCC的疾病发生具有相关性。随着OSCC恶性程度的增加,eya4的表达明显减少,并且在伴有淋巴结转移患者的癌组织中其蛋白表达量较未转移患者的组织中减少,这一结果提示,eya4可能在OSCC恶性肿瘤的发生、发展及转移过程中发挥着重要的调控作用,这为OSCC精确的早期诊断,以及早期干预治疗提供了新的思路。