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芦丁(Rutin,RT)是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌和降血压等活性。然而,由于其水溶性较差、口服生物利用度低,因此在临床应用中受到诸多限制,为了扩大芦丁的应用范围,本实验用透明质酸(Hyaluronic acid,HA)修饰改造芦丁,大大的提高了其水溶性,并且,它使芦丁在抗炎、抗菌、抗氧化等作用方面得到了一定的提高。本课题主要开展了以下研究内容:1通过碱提取和酸沉淀法提取、分离芦丁,条件:提取溶剂为碱水,料液比为1:10,提取温度为60℃,提取时间为30min,提取次数为3次,经核磁共振氢谱(1H-NMR)、红外光谱(FT-IR)、紫外光谱(UV)进行了表征;2用HA修饰改造RT得到溶解度为850mg/mL的水溶性化合物HA-RT(RT在HA上的接枝率为50%),1H-NMR、FT-IR、UV进行了表征,并经溶血试验、稳定性实验以及细胞毒性实验证明HA-RT有较好的生物安全性;3体外采用ELISA试剂盒测RT、HA-RT、地塞米松(DXMS)对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子(NO、TNF-α、IL-1β)的影响,体内采用耳廓肿胀法测RT、HA-RT对二甲苯致炎的小鼠的影响。结果表明HA-RT组炎症因子(NO、TNF-α、IL-1β)的含量均低于RT组,在同一摩尔浓度下,RT、HA-RT及DXMS的抗炎能力大小为DXMS>HA-RT>RT,HA-RT组小鼠耳廓肿胀率低于RT组,说明HA-RT的抗炎效果优于RT(HA-RT中芦丁的含量与芦丁单体的含量相同);4采用试管法测RT、HA-RT对大肠埃希氏菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果显示HA-RT(溶剂为灭菌水,HA-RT中芦丁的含量与芦丁单体的含量相同)对大肠埃希氏菌的MIC、MBC分别为0.08mg/mL、0.11 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC、MBC分别为0.11 mg/mL、0.13 mg/mL,对白色念珠菌的MIC、MBC分别为0.07 mg/mL、0.09 mg/mL,RT(溶剂为20%乙醇)组对三种细菌的MIC(0.4 mg/mL)、MBC(0.8mg/mL)均高于HA-RT组,说明HA-RT的抗菌效果优于RT;5采用清除DPPH自由基法、清除ABTS+自由基法、清除超氧阴离子自由基(O2-)法测RT、HA-RT和Vc的抗氧化活性,结果表现为:在浓度达到一定程度后,Vc和HA-RT对DPPH自由基、ABTS+自由基、O2-自由基的清除率相当,几乎达到100%,但HA-RT对超氧阴离子自由基(O2-)的清除率在各个浓度均大于RT,说明HA-RT的抗氧化能力较强。综上所述,HA-RT的制备达到了最初的研究目的,极大的提高了RT的水溶性,使其在抗炎、抗菌、抗氧化等应用上有较好的开发、生产和应用前景。