益生菌通过改善宿主微生态平衡而发挥有益作用,达到提高宿主健康水平和健康状态的活菌制剂及其代谢产物,可供人类或动物直接使用和喂食。它可改善动物肠道菌群的平衡,降低肠道内有害物质,增强动物机体免疫能力,促进动物生长发育。益生菌作为饲料添加剂具有提高动物生长性能、无毒副作用、无残留等特点,是一种新型的绿色添加剂,可作为抗生素替代物的理想产品。蛋氨酸是动物体内具有重要作用的限制性氨基酸之一,也是提供动物体内蛋白质营养以及合成动物蛋白的必需氨基酸之一。饲用蛋氨酸具有补充动物体内营养,平衡小肠内氨基酸吸收等作用,是一种理想的饲用添加剂。本研究的目的是从分离出的菌株中筛选出蛋氨酸含量相对较高的益生菌作为奶牛饲用添加剂,为提高奶牛产奶量和改善奶品质提供新的技术。本实验从面包、麻花、馒头、发面饼、大列巴等发酵谷物的生面团、米酒、白酒曲酒曲中以及实验室提供的菌种中分离出48株菌进行培养、发酵,利用高效液相色谱检测各菌株发酵液中蛋氨酸的含量,筛选出蛋氨酸含量较高的菌株,并利用16S rDNA分析及Blast分析、特异性引物PCR等技术对所选菌株进行鉴定。最后将含量相对较高的菌株制成菌种发酵液,作为饲料添加剂饲喂奶牛,测定奶牛产奶量以及乳成分的各个指标。通过划板分离培养、镜检等常规方法和高效液相色谱技术筛选出蛋氨酸含量较高的2株益生菌。利用分子生物学方法鉴定出这2株菌为纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌,其发酵液中蛋氨酸含量分别为21.08g/L、19.38g/L。在奶牛实验中,应用纳豆芽孢杆菌作为饲料添加剂,奶牛产奶量和乳成分均有提高。奶牛奶产量提高4.43﹪,乳脂率提高1.06﹪,乳糖质量分数提高0.89﹪,乳蛋白质量分数提高1.04%,干物质质量分数提高0.61﹪。统计分析表明,试验前后乳蛋白质量分数差异显著(P<0.05),乳脂率、乳糖质量分数、干物质质量分数差异极其显著(P<0.01)。实验结果提示,纳豆芽孢杆菌发酵液中蛋氨酸含量较高可能是提高乳产量和乳品质的原因。