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目的:探讨脂质体介导增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转染神经干细胞的最佳条件,转染的NSCs移植入正常大鼠侧脑室后,EGFP作为神经干细胞示踪剂的效果,为NSCs作为基因治疗载体提供实验依据,同时为转染其它功能基因奠定基础。方法:（1）从胎鼠、新生大鼠、成年大鼠海马中分离NSCs,采用NSC克隆悬浮法,选用无血清DMEM/F12培养液,添加剂B27,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及表皮细胞生长因子（EGF）进行体外扩增培养,采用免疫细胞化学法检测NSC标志物Nestin的表达及分化后细胞神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和2,3-环核甘酸磷酸二脂酶（CNP）的表达。（2）胎鼠神经干细胞离体后存活时间研究:在下列时间点进行原代培养:37℃组:1/2,1,2,3,4h;4℃组1/2,1,2,3,4天,观察细胞生长状态。（3）检测脂质体、质粒不同剂量下、脂质体-质粒复合物不同作用时间下、不同细胞传代次数下EGFP转染NSCs的转染效率。G418对阳性细胞筛选,观察细胞生长情况。将筛选阳性的细胞进行传代及诱导分化的观察,免疫细胞化法鉴定。MTT法检测转染前后NSCs的活力。（4）将筛选后的NSCs立体定向仪移植入大鼠侧脑室,分别移植后4W,8W,12W,15W,行大鼠脑组织冰冻切片制作,荧光观察。结果:（1）培养的NSCsNestin抗体标记阳性,分化后细胞表达神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的特异性抗原;（2）在37℃组,脑组织离体后1小时,已无法培养出干细胞,在4℃组,离体后3天,仍可以培养出NSCs。（3）当脂质体剂量为8μl,质粒（pEGFP-N1）剂量为6μg,复合物作用时间为6h,3代时转染效率最高,为27.6%。随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低。3代G2-M期所占的比例也最高。转染率与G2-M期存在一定的关系。G418最小致死浓度为5001μg/ml。MTT比色法测定同期未转染和转染NSCs活性,两组之间无显著性差异（P＞0.05）;（4）分别移植后个时间点行大鼠脑组织冰冻切片制作。观察随着时间的推移,绿色荧光逐渐朝针口周围扩展,在2W可见绿色荧光,强度较弱,在4-8W荧光最强,随后逐渐减弱至12W时荧光基本消失,15W时观察不到任何的荧光。结论:（1）从大鼠海马中分离培养出具有自我更新和多分化潜能的细胞,该类细胞属于中枢神经系统的NSCs,低温下更易生长,是进行转染的良好细胞模型;（2）脂质体可较为高效转染NSCs,移植到脑内能有效的表达,且可在脑内迁移,与脑组织整合,EGFP是NSC有效的示踪方法,进一步证实NSCs是一种理想的基因治疗的靶细胞,为转染其它功能基因奠定了基础。