绦虫组织性类固醇激素水平测定及其受体的免疫定位

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本文分为两章:绦虫组织三种性类固醇激素水平的检测和性类固醇激素受体在绦虫组织中的免疫组织化学定位。   第一章采用双抗体夹心光化学法分别检测了三种性类固醇激素:雄激素睾酮、雌激素雌二醇和孕激素孕酮在四角瑞利绦虫(Raillietina tetragona)体内的含量水平,同时也检测了取样时绦虫所在肠道内样品周围食糜中这三种激素的含量。结果显示:在虫体头节和颈片段睾酮含量较低,为0.0159nmol/g,从幼节开始逐渐升高,最高值为0.0596nmol/g,到成节后段呈降低趋势,孕节睾酮含量明显低于0.020nmol/g,但保持在0.010nmol/g左右。孕酮浓度在头节、颈、幼节中含量变化不大,都处于高水平,以早期幼节中含量最高,达0.3607nmol/g,随后逐渐下降,成节处最低,成节、孕节中孕酮含量没有太大差别,都在0.050nmol/g上下。虫体中孕酮含量总体高于睾酮。雌二醇未检出。食糜中睾酮为0.0258nmol/g,孕酮为O.Ol07nmol/g,雌二醇为0.0223nmol/g。以上结果表明,性类固醇激素在进化地位较原始的扁形动物就已经存在,并且对其发育和繁殖都起着重要的生理作用,但是雌二醇结构可能与高等脊椎动物存在一定差异。   第二章采用免疫组织化学方法,分别通过相应的单克隆抗体(识别受体蛋白的N末端)检测了三种性类固醇激素受体:雄激素受体(Androgen Receptor,AR)、雌激素受体(Estrogen Receptor,ER)和孕激素受体(Progesterone Receptor,PR)以及细胞色素P450芳香化酶(用多克隆抗体)在棘盘瑞利绦虫(Raillietinaechinobothrida)和四角瑞利绦虫(Raillietina tetragona)组织中的分布。结果表明在棘盘瑞利绦虫的精巢、卵巢、卵囊、核周体以及皮层下方实质组织中都有AR分布,并且阳性结果较为明显;ER和PR只在精巢和卵巢以及卵囊组织中有弱阳性分布。四角瑞利绦虫组织中,只有AR在幼节皮层和实质组织、精巢、卵巢、卵囊、皮层组织有阳性结果显示;ER除在幼节皮层和实质组织、精巢和皮层有微弱阳性反应外,其他组织均无阳性分布;PR则全部显示为阴性结果。两种绦虫组织中细胞色素P450芳香化酶全部显示阳性免疫反应,无组织特异性。性类固醇激素受体的这些免疫组化特征和组织定位表明绦虫组织中AR、ER、PR同脊椎动物三类性激素受体有很大的相似性,说明性激素受体在动物进化的早期就已经存在,AR和ER在进化过程中保守性较高,同脊椎动物AR和ER类似;孕激素受体蛋白在N端氨基酸序列则可能存在较大变化。但是以上实验结果至少可以证明,这些性激素受体在动物的整个进化历程中都保持着一定的保守性,同时也表明这些受体在动物的发育繁殖过程中都起着重要作用。
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