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背景与目的:膀胱恶性肿瘤是泌尿系统中最常见的肿瘤。膀胱癌的发病率较高,且死亡率也居高不下,对社会和个人都造成了沉重的负担。虽然膀胱癌的诊断和治疗已经取得了巨大的进步,但其5年生存率仍不能令人满意。目前的治疗手段包括手术、放化疗、生物治疗等,但术后复发和转移率较高,对患者生活质量造成严重影响。了解膀胱癌深层的发病机制,找到影响膀胱癌发生、发展的分子标志物,研究探索新的治疗方法对膀胱癌的早期诊断及治疗有重大意义。环状RNA是近年来的研究热点,已经发现多种环状RNA在肿瘤组织中异常表达,对肿瘤进展有重要影响。Circ-ZKSCAN1是最近发现的环状RNA,已有研究表明其对肝细胞癌的发展有抑制作用,而在膀胱癌中暂无研究报道。因此,本课题旨在研究Circ-ZKSCAN1在膀胱癌中的表达情况,并验证其对膀胱癌细胞功能的影响。为了进一步调控Circ-ZKSCAN1在膀胱癌中的表达,我们根据合成生物学原理,构建了膀胱癌靶基因定量调控系统,并验证其可行性。方法:我们利用实时QRT-PCR方法检测circ-ZKSCAN1在51对膀胱癌组织标本和两种膀胱癌细胞系中的相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理特征的关系。我们构建了circ-ZKSCAN1的过表达质粒来上调膀胱癌细胞系中的circ-ZKSCAN1水平,并将其转入膀胱癌细胞中分别验证对细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。我们在膀胱癌靶基因定量调控系统中插入能结合GFP基因的向导RNA来构建验证质粒,并在稳定表达GFP基因的293T细胞中验证合成系统的可行性。结果:膀胱癌组织中circ-ZKSCAN1的表达水平明显低于配对癌旁正常组织,其表达水平与肿瘤原发灶情况相关。在膀胱癌细胞系中,circ-ZKSCAN1的表达水平也是明显低于膀胱正常尿路上皮细胞。Circ-ZKSCAN1的过表达质粒能有效的升高膀胱癌细胞中circ-ZKSCAN1的表达水平,并且将过表达质粒转染进膀胱癌细胞后能明显抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力。将膀胱癌靶基因定量调控系统转移至稳定表达GFP基因的293T细胞后,GFP基因的表达水平受到显着抑制。结论:Circ-ZKSCAN1作为一个抑癌基因在膀胱癌的进展中发挥重要的影响,有可能是膀胱癌中新的分子生物标记物。膀胱癌靶基因定量调控系统可能成为研究治疗膀胱癌、调控基因表达的一种新的方法。