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目的:研究高孜万提取物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用,为阐述该药材抗心肌缺血活性的物质基础及其进一步的开发利用提供试验依据。方法:1)建立缺氧/复氧体外小鼠原代心肌细胞模型以模拟缺血再灌注损伤。实验分为二十四组,正常对照组,缺氧/复氧组,阳性对照组(缺氧/复氧+1.25mg/mL葛根素),高、中、低剂量乙醇提取物处理组(缺氧/复氧+高、中、低浓度高孜万乙醇提取物),高、中、低剂量石油醚萃取物处理组(缺氧/复氧+高、中、低浓度高孜万石油醚萃取物),高、中、低剂量乙酸乙酯萃取物处理组(缺氧/复氧+高、中、低浓度高孜万乙酸乙酯萃取物),高、中、低剂量正丁醇萃取物处理组(缺氧/复氧+高、中、低浓度高孜万正丁醇萃取物),高、中、低剂量水萃取物处理组(缺氧/复氧+高、中、低浓度高孜万水萃取物),高、中、低剂量总黄酮有效部位处理组(缺氧/复氧+高、中、低浓度高孜万总黄酮有效部位),高、中、低剂量芦丁处理组(缺氧/复氧+高、中、低浓度高孜万芦丁)。采用MTT法检测原代心肌细胞存活率,采用酶标法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、细胞内的丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活力。2)建立C57BL/6小鼠缺血再灌注模型,取C57BL/6小鼠分为假手术组、心肌缺血再灌注组、高孜万总黄酮有效部位高中低剂量组,采用抗原-抗体Elisa法测定血清心肌酶CK-MB、心标志物CTn-I活性,采用伊文思蓝-氯化三苯四氮唑染色法测定心肌梗死率,并对缺血梗死区进行病理HE染色。结果:1)与正常对照组比较,缺氧/复氧组呈现时间依赖性地降低原代心肌细胞存活率;与缺氧/复氧组比较,乙醇提取物处理组、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物、总黄酮有效部位、阳性对照及芦丁组显著提高细胞存活率(P<0.01或P<0.05),降低LDH、MDA含量(P<0.01或P<0.05),SOD活力显著性提高,差异有统计学意义。综合作用时间和作用浓度,乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物作用较强(P<0.01)。2)各组心肌梗死百分率比较:与假手术组比较,模型组心肌梗死百分率显著提高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,高孜万总黄酮有效部位组心肌梗死百分率显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。各组中CK-MB和CTnⅠ水平比较:与假手术组比较,模型组CK-MB和CTnⅠ水平显著性增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,高孜万总黄酮有效部位组CK-MB和CTnⅠ水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:1)高孜万乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物、总黄酮有效部位、芦丁对乳鼠细胞缺氧/复氧造成的损伤具有保护作用,其机制可能为通过干预平衡氧化应激产物的生成和抗氧化应激的酶系统来减少缺氧/复氧所致原代心肌细胞氧化应激损伤。2)高孜万总黄酮有效部位对小鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,可以降低心肌梗死率,减少心肌酶水平。