IL-6对NIH3T3细胞MMP-3和TIMP-1表达的影响

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研究目的椎板切除术是临床上治疗腰椎间盘突出症、腰椎管狭窄症和腰椎椎管内肿瘤最常采用的手术方式,但是椎板切除术后,5%-15%的病人会出现术后的下腰部顽固性痛疼和不适,被称为腰椎手术失败综合症(FBSS)。硬膜外瘢痕和神经根周围广泛的纤维化的形成被认为是FBSS的重要原因,主要是由于细胞外基质(ECM)异常沉积所致,基质金属蛋白酶类家族(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)平衡异常在此过程中起到重要作用。当前治疗FBSS的措施有限,有研究显示细胞因子可以调节MMPs与TIMPS平衡参与ECM的降解过程,本文拟初步观察IL-6对小鼠成纤维细胞株NIH3T3 MMP-3和TIMP-1表达的影响,为IL-6应用于防治FBSS提供初步的实验依据和理论基础。研究内容和方法1.小鼠NIH3T3于5%CO2细胞培养箱中培养,取传代培养5-8代的细胞进行实验。2.实验组:NIH3T3细胞分为5组,正常组及IL-6 5、10、15、20ug/L组,相应干预12h后分别收集培养的细胞。3.应用免疫印迹方法检测细胞内MMP-3和TIMP-1蛋白表达改变。4.应用RT-PCR方法检测细胞内MMP-3和TIMP-1mRNA水平改变。结果IL-6可以剂量依赖性上调NIH3T3细胞MMP-3蛋白及mRNA的表达,下调TIMP-1蛋白及mRNA的表达。结论IL-6能够影响NIH3T3细胞MMP-3与TIMPS表达的平衡,可能干扰硬膜外瘢痕形成。
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