【摘 要】
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TrxG(Trithorax Group)家族是一组与发育密切相关的基因,可通过多种染色质水平的调控方式影响Hox等目的基因的表达,其效应是后成性发育调控的重要组成部分.ASH2L是我组克隆的
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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TrxG(Trithorax Group)家族是一组与发育密切相关的基因,可通过多种染色质水平的调控方式影响Hox等目的基因的表达,其效应是后成性发育调控的重要组成部分.ASH2L是我组克隆的一个新基因,与果蝇ASH2基因同源,也属于TrxG家族.ASH2L有ASH2L1和ASH2L2两个可变剪接异构体.ASH2L1的cDNA全长2381bp,编码一个具有628个氨基酸的蛋白;ASH2L2的cDNA全长2450bp,编码一个具有534个氨基酸的蛋白.为了揭示ASH2L基因的功能,本实验室在前期工作中以全长ASH2L为"诱饵"蛋白,用酵母双杂交技术筛选Hela细胞库,寻找与之相互作用的蛋白.最终筛选到3个阳性克隆,BLAST结果表明该相互作用蛋白基因与参与低等生物X染色体剂量补偿机制(X Chromosome dosage compensation)的蛋白DPY-30高度同源,因此被命名为DPY-30-like.为了进一步验证这种相互作用,我们进行了GST-Pull down试验:在大肠杆菌中表达了GST-DPY30-like融合蛋白,同时将构建的ASH2L真核表达载体转染Hela细胞,获得真核表达的ASH2L蛋白;GST-Pull down结果证实,ASH2L和GST-DPY30-like能在体外结合.
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