【摘 要】
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目的： 观察电针关元穴对去卵巢骨质疏松症大鼠骨形成的影响，从Wnt-β-catenin信号通路的相关因子探讨电针关元穴调节骨形成的作用机制。 方法： 将4.5月龄SD雌性大鼠随
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目的： 观察电针关元穴对去卵巢骨质疏松症大鼠骨形成的影响，从Wnt-β-catenin信号通路的相关因子探讨电针关元穴调节骨形成的作用机制。 方法： 将4.5月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Ovx)、电针关元组(CV4)、电针非经非穴组(Mock)，每组各10只。除假手术组外，各组大鼠均切除双侧卵巢(ovariectomy，OVx)制备绝经后骨质疏松症模型，假手术组仅切除卵巢周围等量脂肪组织。造模成功后，关元组和非经非穴组每日电针1次，频率为2Hz，强度为1mA，每次持续20min，10d为一个疗程，疗程间休息1天，共治疗3个疗程;模型组和假手术组不进行针刺治疗，只给予相同的套头、抓取、固定操作，疗程同针刺组。治疗结束后，测定各组大鼠骨密度值;用HE染色法检测大鼠左侧股骨骨小梁的变化;运用三点弯曲实验检测大鼠右侧股骨骨生物力学的变化;酶联免疫吸附法测定血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)的浓度;提取股骨骨组织mRNA，用RT-PCR法检测股骨细胞中Wnt3a，β-catenin和Runx2 mRNA的表达;采用免疫组织化学方法检测大鼠股骨Wnt3a，β-catenin蛋白的表达情况。 结果： 1.左股骨头骨小梁彩色图像观察:和模型组相比较，电针关元穴能够显著改善模型大鼠骨小梁结构松散、排列紊乱、密度降低的骨质疏松形态学改变;非经非穴组与模型组比较没有明显差异。 2.骨生物力学指标与骨密度检测:电针关元穴组能改善股骨最大载荷和断裂载荷，并提高骨密度，与模型组比较均有显著差异(P＜0.05);电针关元穴组与假手术组比较，统计学上无显著差异性（P＞0.05）;电针非经非穴组与模型组比较无明显差异（P＞0.05）。 3.血清ALP、BGP水平:电针关元穴组与模型组、非经非穴组相比，ALP、BGP水平较高，有统计学差异性（P＜0.05）;电针非经非穴组与模型组比较，统计学上无显著差异性（P＞0.05）。 4.RT-PCR法检测Wnt3a、β-catenin、Runx2基因表达结果:模型组大鼠中Wnt3a、β-catenin以及Runx2 mRNA表达明显降低，和假手术组比较有显著性差异(P＜0.05);电针关元穴组能够显著上调Wnt3a、β-catenin以及Runx2的表达，和模型组比较有显著性差异(P＜0.05);电针关元穴组和假手术组比较无显著差异（P＞0.05）。 5.免疫组化Wnt3a、β-catenin蛋白表达结果:电针关元穴能够影响Wnt-β-catenin通路中关键信号分子Wnt3a和β-catenin蛋白的表达，与模型组比较均有显著差异(P＜0.05);电针关元穴组与假手术组比较，统计学上无显著差异性（P＞0.05）电针非经非穴组没有显著改善上述蛋白的表达，与模型组比较统计学上无显著差异性（P＞0.05）。 结论： 电针关元穴可以调节去卵巢骨质疏松症模型大鼠的骨形成，增强骨强度，且具有穴位特异性，其机理可能是激活了Wnt-β-catenin信号通路中关键信号分子Wnt3a，β-catenin，Runx2的表达。
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