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棉花黄萎病是棉花生产过程中最具毁灭性的病害之一,属于土传病害。棉花黄萎病菌具有分布广、危害重、寄主范围宽、传播途径多、存活时间久等特点。防治棉花黄萎病最简单、经济、有效的方法是选育抗病品种。然而,国内外棉花抗黄萎病品种的培育进程缓慢,其中,除了棉花抗性种质资源的缺乏外,另一个重要原因就是缺乏一套简单、快速、高效的棉花抗黄萎病性鉴定方法。为了解决以上问题,本研究试图用毒素代替病原菌鉴定棉花抗黄萎病性,并分析了毒素鉴定在棉花抗黄萎病性鉴定中的可行性,结果如下: 1.采用温室盆钵接菌法和无底纸钵蘸根法分别比较V08sn-1、安阳菌、V07df23种黄萎病菌的致病力差异,结果表明3种黄萎病菌对棉花的致病力呈显著性差异,其中V08sn-1致病力最强,安阳菌中等,V07df2最弱。且两种方法所得出的黄萎病菌致病力间呈明显的正相关,相关系数为0.933,但所得出的棉花抗黄萎病性级别却不完全吻合。其中,通过以上两种接菌方法,棉花ZJ10584对V08sn-1均表现为感病;而对安阳菌分别表现为感病和耐病;对V07df2分别表现为耐病和抗病。 2.毒素抑制棉花胚根伸长的实验验证了黄萎病菌毒素具有致病活性。利用叶片涂抹毒素法和毒素浸根法,测定3种黄萎病菌毒素对棉花的致萎度。结果表明,这3种毒素对棉花致萎度呈显著性差异,且以上两种鉴定方法与温室盆钵接菌法的鉴定结果都呈明显的正相关,相关系数分别为0.847和0.856。此外,这两种毒素鉴定方法所得出的棉花黄萎病抗性级数与温室盆钵接菌法完全吻合。说明毒素鉴定法用于棉花抗黄萎病性鉴定是可行的、准确的。 3.测定毒素处理对棉花愈伤组织生长的影响,实验结果表明,不同毒素处理对棉花愈伤组织的增重量、MDA、POD含量的影响呈显著性差异,且棉花愈伤组织的增重量、MDA、POD含量与温室盆钵接菌法的鉴定结果呈明显的正相关,相关系数分别为-0.822,0.913,0.963。此外,同一毒素对不同棉花愈伤组织的增重量、MDA、POD含量的影响也呈显著性差异,说明基于组织培养技术的棉花抗黄萎病鉴定方法是可行的。 本研究表明用毒素代替病原菌鉴定棉花抗黄萎病性是可行的,为加快棉花抗黄萎病育种进程提供了技术保障。基于组织培养技术的棉花抗黄萎病鉴定方法为毒素代替抗生素用于转基因材料的筛选和鉴定提供了新的思路,减少了抗生素的使用量,大大降低了实验成本。