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为了阐明HAb18G/CD147的功能,该研究旨在于人SMMC7721肝癌细胞株稳定表达HAb18G及其胞内、外片段,并用此细胞株作为体外细胞模型来研究HAb18G/CD147在细胞内Ca<2+>信号转道通路及肝癌转移中的作用机制.应用脂质体转染方法将HAb18G eDNA全长,细胞内片段和跨膜区,细胞外片段和跨膜区分别转染到人SMMC7721肝癌细胞内,经用Northern blot以及免疫细胞化学方法进行表达鉴定,获得稳定表达HAb18G及其胞内、外片段的细胞系,分别命名为T7721、T7721δN和T7721δC.细胞内Ca<2+>测定结果显示,在未转染的7721细胞内8-Bromo-cGMP(8-Br-cGMP)抑制了thapsigargin(Tg)诱导的Ca<2+>内流,并呈现剂量依赖性.cGMP的这种抑制作用可以被PKG的抑制剂KT5823(1μM)所消除,表明cGMP对Tg诱导的Ca<2+>内流的负性调控作用是通过PKG通路起作用的.进一步我们通过在人7721肝癌细胞转染表达HAb18G胞内、外片段来观察HAb18G/CD147分子结构和功能的关系.已知MMPs在肿瘤的转移过程中发挥重要的作用,为进一步探讨人肝癌细胞中HAb18G/CD147高表达诱导MMPs分泌和活化的作用机制,我们利用7721细胞系以及表达HAb18G及其胞内、外片段的各转染细胞系进行了胞外Ca<2+>诱导实验以及明胶酶谱分析实验.将细胞内Ca<2+>释放诱导剂Tg以及细胞内Ca<2+>抑制剂SNAP引入上述实验体系,探讨Ca<2+>信号调控在HAb18G/CD147诱导MMP分泌与活化过程中的参与机制.总之,该研究所有实验结果表明:(1)人肝癌细胞内Ca<2+>库依赖的Ca<2+>内流受到NO/cGMP通过PKG依赖通路的负性调控,这一负性调控可被HAb18G/CD147的表达所抑制;(2)HAb18G/CD147的表达可通过干扰NO/cGMP对Ca<2+>内流的调控增强人肝癌细胞的转移能力;(3)HAb18G/CD147细胞内、外结构片段对于HAb18G/CD147介导的影响细胞内Ca<2+>调节、MMPs的分泌与活化、转移相关过程的效应都是必需的,尽管不同的结构区域可能具有不同的功能.