内蒙古螺旋藻蛋白酶解工艺优化研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaobenben
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本文以内蒙古螺旋藻粉为原料,研究不同蛋白酶酶解螺旋藻的工艺条件及水解产物的分子量分布情况。同时,对水解液精制的工艺条件进行了详细研究。选择碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶四种蛋白酶水解内蒙古螺旋藻。在单因素试验及正交试验的基础上确定了各自的最佳水解条件。方差分析得到四种蛋白酶对螺旋藻的水解能力在各自的最适条件下依次是木瓜蛋白酶>碱性蛋白酶>胃蛋白酶>胰蛋白酶。木瓜蛋白酶水解螺旋藻时其水解度显著高于其他三种,胰蛋白酶水解效果最差。运用SAS软件进行响应面分析得出木瓜蛋白酶的最佳水解条件为:温度62℃,pH 6.5,酶与底物浓度之比E/S=4.5%,水解时间为3h,此时,螺旋藻蛋白的水解度为36.18%。螺旋藻水解液颜色深,含盐量高。本研究用活性炭进行脱色处理,根据脱色后水解液的吸光值及水解液肽的回收率,确定活性炭处理螺旋藻水解液的条件为:活性炭浓度为3%,脱色pH为2.0,脱色温度60℃,脱色时间40min,此时,脱色后水解液的肽回收率都在80%左右。用离子交换树脂进行脱盐处理,在流速为6倍柱体积/h时,肽回收率和脱盐率都达到80%以上。利用凝胶层析Sephadex G-15分析木瓜蛋白酶水解螺旋藻水解产物中分子量的分布情况。试验结果表明,使用木瓜蛋白酶水解螺旋藻,其水解产物的分子量绝大部分在1000u以下,其中,平均分子量为150-700u的小肽占71.3%,平均分子量<150u的小肽及部分游离氨基酸占24.7%,大分子量多肽约占4%。
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