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荔枝(Litchi chinensis Sonn.)营养丰富,但过量食用易引起发热、口舌生疮、咽喉肿痛等炎性症状,俗称“上火”,对消费者的健康存在潜在危险,也是制约荔枝及其加工产品销售的问题之一。为此,本研究利用小鼠巨噬细胞J774体外炎症模型和动物模型,对荔枝果肉粗提物诱导炎症性“上火”反应进行初步研究,主要研究内容及结果如下:
1、荔枝果肉采用溶剂提取法得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部4种荔枝果肉粗提物,萃取率分别为0.04％、0.08%、1.50%、7.51%。
2、为了检测细胞模型中PGE2的含量,研究了巨噬细胞培养上清PGE2含量的高效液相色谱法(HPLC)。色谱条件为:Ultimate XB-C18反相柱(250-mm×4.6mm,5μm);以乙腈和0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液(60:40,V/V)作为流动相;流量为1mL/min;检测波长为196nm。该方法标准曲线良好,线性范围为0.5625-90μg/mL,标准曲线为:Y=17000X+14200,相关系数为R2=0.99907,出峰时间为3.988 min。
3、用不同溶剂粗提物体外培养巨噬细胞J774,通过HPLC法和Crriess化学法检测细胞上清PGE2和NO含量,研究其对巨噬细胞分泌炎症介质的影响。结果表明:与空白对照组相比,乙酸乙酯部粗提物在100-900μg/mL的浓度范围内显著提高巨噬细胞J774上清PGE2、NO的含量(P＜0.05);石油醚、正丁醇、水部粗提物对巨噬细胞上清PGE2、NO含量无显著影响(P＞0.05)。900μg/mL乙酸乙酯部粗提物能显著提高巨噬细胞COX-2和iNOS的mRNA表达水平(P＜0.05)。表明荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物可能通过诱导COX-2和iNOS mRNA的表达促进炎症介质PGE2和NO的生成,从而引起炎症性“上火”反应。
4、7周龄雄性ICR小鼠随机分组,灌胃荔枝果肉不同溶剂粗提物,研究其对机体分泌炎症介质、氧化还原状态和血浆中糖、脂耐受能力的影响。结果显示:与正常对照组相比,荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物灌胃的小鼠血清PGE2、NO、HA含量显著上升,T-AOC、GSH-Px活力显著下降(P＜0.05),MDA含量显著上升(P＜0.05);肺脏PGE2、NO含量显著上升(P＜0.05),T-AOC、GSH-Px活力显著下降(P＜0.05),MDA显著上升(P＜0.05);脾脏PGE2、NO、5-HT含量显著上升(P＜0.05),T-AOC显著下降(P＜0.05),MDA显著上升(P＜0.05)。腹腔巨噬细胞吞噬能力显著加强(P＜0.05)、血管通透性显著上升(P＜0.05)、腹腔渗透液炎症介质PGE2、NO、5-HT、HA含量显著上升(P＜0.05),血浆葡萄糖、甘油三酯清除率显著下降(P＜0.05)。初步表明荔枝果肉乙酸乙酯部粗提物可能刺激机体分泌炎症介质,引起机体氧化还原状态失衡,并导致血浆葡萄糖、甘油三酯清除率下降进而诱导机体炎症性“上火”反应。